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分子植物育种(网络版)
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online)
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1.1.2 脯氨酸测定的最适取样量
分别取 0.020 g、0.040 g、0.060 g、0.080 g、0.100 g、
0.120 g、0.150 g 和 0.200 g 的未经耐旱处理和耐旱
处理 30 d 的皁籼 15 水稻叶片，测定脯氨酸含量，
设 3 组平行。绘制脯氨酸含量与水稻叶片重量的曲
线图(图 2; 图 3)。
图 2 未经耐旱处理叶片脯氨酸含量和样品取样量的关系
Figure 2 Relationship between leaf Proline content and
sampling amount without drought
图 3 耐旱处理 30 天叶片脯氨酸含量与取样量关系
Figure 3 Relationship between leaf proline content and
sampling amount ot 30 day under drought
从图 2、图 3 可以看出，无论是未经耐旱处理，
还是耐旱处理 30 d，虽然其脯氨酸含量的绝对值差
异较大，但其曲线都在 0.1 g 取样量处斜率发生变化，
小于 0.1 g，表现为脯氨酸含量增加较快，而大于 0.1 g，
则曲线变平缓，脯氨酸含量增加较慢。因此，0.1 g
叶片取样量为脯氨酸含量检测的最适取样量。
1.2 干旱胁迫条件下 CBF3 对脯氨酸含量变化的影响
脯氨酸测定方法优化后，笔者设计 1.2.2 干
旱处理试验条件，分别定期取样测定其沙土含水
量和水势变化，在此基础上，进一步利用含 CBF3
的转基因 2 材料和不含 CBF3 的转基因 5 NT 材
料，研究干旱胁迫条件下 CBF3 对脯氨酸含量变
化的影响。
1.2.1 沙土含水量变化
沙土含水量变化测定如图 4 所示。
图 4 耐旱试验对照组和处理组沙土含水量的变化
Figure 4 Change of water content of sandy soil of control and
treatment group under drought
从图 4 中可以看出，对照组沙土含水量均保持
在 23%左右，而处理组均从 24%下降至 5%，下降
幅度明显，适宜做耐旱差异试验。
1.2.2 叶片水势变化
不同水稻材料的水势变化如图 5 所示。
图 5 耐旱试验对照组和处理组材料水势变化
Figure 5 Change of water potential of control and treatment
group under drought
从图 5 可以看出，对照组材料和试验组转基因
2 水势下降幅度较小，差值在 0.1- 0.2 之间。而处理
组的转基因 5 NT 则从-1.27 MPa 下降至- 2.5 MPa,
差值达到 1.23 ，下降幅度明显。由此表明， CBF3
的存在能延缓水势的下降，提高水稻的耐旱性。
1.2.3 干旱胁迫条件下的 CBF3 对脯氨酸含量变化
的影响
根据上述沙土含水量和叶片水势的变化，利用
图 1 的不同范围标准曲线的脯氨酸测定方法，进一
步研究干旱胁迫条件下的 CBF3 差异影响下的脯氨
酸含量变化(图 6)。