Basic HTML Version
分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1487-1492
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1487-1492
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1489
图
2
单位重量愈伤组织在单位时间内的增重
注
: A:
冀
91-31; B:
沪
749513; C:
大铃棉
; D:
锦
444; E:
库
车
T94-6; F:
绵阳
73-39; G:
苏
7036
远缘
; H:
荆
55263; I:
邯
8959
Figure 2 Callus weight gain of unit weight per unit time
Note: A: Jin91-31; B: Hu749513; C: Big boll cotton; D: Jin444;
E: Kuche T94-6; F: Mianyang73-39; G: Su7036 distant
hybridi- zation; H: Jing55263; I: Han8959
细胞胚胎发生途径再生的棉花品种
(
系
)
一致
(
罗晓
丽等
, 2011)
。
在
MSB3
培养基上经过
4
个月的连续继代培养，
10
个供试的优异棉花材料仅有大铃棉和邯
8959
的
愈伤组织分化出淡黄色、米粒状的胚性愈伤组织
(
图
3A)
。将这两个供试材料的新鲜胚性愈伤组织转移
到愈伤组织分化培养基
(MSB4)
上，经过
1~2
次继代
培养胚性愈伤组织顺利萌发，但大铃棉和邯
8 959
的胚性愈伤组织的萌发率却存在差别
(
萌发率为
3
周
内单位重量的胚性愈伤组织
(g)
萌发形成的胚状体
数
(
个
)) (
图
4)
，邯
8 959
的胚性愈伤组织萌发能力强
于大铃棉，但两者都能最终形成子叶胚
(
图
3B)
。
图
3
棉花胚性愈伤组织的诱导与分化
注
: A:
胚性愈伤组织
; B:
胚状体的形成
Figure 3 Induction and differentiation of cotton embryogenic
callus
Note: A: Embryogenic callus; B: The formation of embryoid
图
4
大铃棉和邯
8959
的体细胞胚萌发比较
注
: a, b
表示在
0.05
水平上显著
Figure 4 Comparison of SE germination between Big boll
cotton and Han8959
Note: a and b indicate significance at 0.05 level
将完全成熟的子叶胚转移到成苗再生培养基
(MSB5)
上，子叶胚
(
图
5A)
逐渐发育再生成完整植株
(
如图
5B)
。
2
讨论
通过体细胞胚胎发生是进行棉花农杆菌介导
的遗传转化最好的途径，但建立棉花体细胞胚胎发
生途径的再生体系却非常困难。在棉花体细胞胚胎
发生过程中，培养基成分、激素、外植体材料等都
影响着棉花愈伤组织的诱导与胚状体的形成。但是
外植体的基因型是这些限制因子中的最重要因素
之一，针对此问题本课题选择生产上具有优异性状
的棉花品种
(
系
)
来筛选高体胚发生能力的种质材
料。这些材料具有广泛的优异性状，包括大铃、长
绒、高比强、耐黄萎病、高油份以及综合性状较好
的棉花材料。在添加
2,4
-
D (0.1 mg/L)
和
KT (0.1 mg/L)
的
MSB
培养基上所有材料都能诱导出愈伤组织，这
与前人的研究基本一致
(Zhang et al., 2000)
，即
2,4
-
D
图
5
棉花体细胞胚胎发生与植株再生
注
: A:
胚状体形成
(
子叶胚
); B:
再生植株
Figure 5 Cotton somatic embryogenesis and plant regeneration
Note: A: The formation of embryoid (Cotyledon); B:
Regenerated plants