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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1487-1492
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1487-1492
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1488
棉系列等少数品种获得了体细胞胚和再生植株
(
谢
德意等
, 2007)
。目前我国生产上种植的棉花品种超
过
200
个，但其中绝大多数品种难以形成体细胞胚
胎，这严重限制了棉花遗传转化与改良。此外，在
棉花分子生物学研究中，除了分离与克隆目标基
因、构建高效表达载体等技术外，选择适当的受体
材料以及建立其相应的组织培养和高效的遗传转
化与再生体系也至关重要
(
罗晓丽等
, 2011)
。因此，
利用现代生物技术的手段来改良棉花的抗逆性和
丰产性以及创新棉花种质资源，必须筛选具有高频
体细胞胚胎发生及再生能力的优异棉花种质材料，
尤其要适用于大田生产上广泛使用的优异棉花材
料。本研究旨在筛选我国优异棉花种质材料的体细
胞胚胎发生及植株再生材料，以加快棉花转基因育
种和基因功能分析、转基因棉花产业化推广的进程。
1
结果与分析
1.1
棉花愈伤组织诱导与继代
以棉花下胚轴切段为外植体诱导愈伤组织，所
用培养基为诱导培养基
(
即
MSB2)
。经过
7 d
左右的
诱导，外植体的两端膨大，形成少量的愈伤组织
(
如
图
1)
。在培养
30 d
后，
10
个供试棉花材料均能形成
愈伤组织，而且愈伤的量比较多。但这些棉花材料
的愈伤组织诱导率不尽相同，大铃棉和邯
8 959
愈伤
组织诱导率可以达到
100%
。所有供试棉花材料诱导
的愈伤组织的颜色、质地不尽相同，详见表
1
。
图
1
棉花下胚轴诱导愈伤组织
Figure 1 Callus induction of cotton hypocotyls
1.2
愈伤组织的分化与植株再生
将诱导出的新鲜愈伤组织继代到愈伤增值培
养基
(MSB3)
上进行连续继代培养，并对愈伤组织的
生长速度进行了观察。取每个供试棉花材料的愈伤
组织
1 g
左右接种到
MSB3
培养基上，
7 d
后称量其增
重，结果如图
2
。
从图
2
并结合表
1
可以看出，大铃棉和邯
8959
两
个棉花材料的愈伤组织生长速度相对较慢，而且其
生长状态比较疏松、颜色淡黄，与其他能够通过体
表
1
不同棉花材料的愈伤组织诱导情况
Table 1 Callus induction status of different cotton materials
试验材料
外植体数
愈伤组织诱导率
(%)
愈伤组织状态
Test material
No. of explant
Callus induction rate (%)
Callus status
冀
91
-
31
100
90
泥状
,
灰白色
Jin91
-
31
Sludgy, gray
沪
749513
100
92
疏松
,
白色
,
有光泽
Hu749513
Loose, white, shiny
大铃棉
100
100
疏松
,
淡黄色
,
米粒状
Big boll cotton
Loose, light yellow, rice grain-like
锦
444
100
85
疏松
,
白色
,
有光泽
Jin444
Loose, white, shiny
库车
T94
-
6
100
95
泥状
,
灰白色
Kuche T94
-
6
Sludgy, gray
绵阳
73
-
39
100
88
泥状
,
灰白色
Mianyang73
-
39
Sludgy, gray
苏
7036
远缘
100
80
致密
,
浅绿色
,
生长旺盛
Su7036 distant hybridization
Dense, light green, vigorous growth
荆
55263
100
95
疏松
,
白色
,
雪花状
Jing55263
Loose, white, snowflake
邯
8959
100
100
疏松
,
淡黄色
,
米粒状
Han 8959
Loose, light yellow, rice grain-like
山农
6
号
100
96
疏松
,
部分褐化
Shannong6
Loose, part of the browning