Basic HTML Version
分子植物育种
(
网络版
), 2010
年
,
第
8
卷
,
第
4
篇
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2010, Vol.8, No.4
http://mpb.
5th
.sophiapublisher.com
共
6
页，第
4
页
图
4 CB033
和辉县红后代
F
2:3
家系的抗性表现
注
: A:
感病单株
; B:
抗病单株
Figure 4 Resistant performance of CB033 and hui xiangho
ng’
derivetives
Note: A: Susceptible plant; B: Resistant plant
图
5
Xcinau188
在部分
F
2:3
家系纯合抗病
,
感病单株的带型检
测结果
注
: R:
抗病单株
; S:
感病单株；
P1: CB033; P2:
辉县红
; V:
簇毛麦
; M: DL2000 marker
Figure 5 Amplification products by
Xcinau188
in resistant
parent Line CB033 (P1), susceptible parent Hui xianhong (P2),
part pure resistant individuals of F
2:3
Note: R:Resistant plants; S: Suspectible plants; P1: CB033; P2:
Hui xianhong; V: Haynaldia villosa; M: DL2000 marker
2
讨论
本研究筛选到与
Pm21
基因连锁的
EST-SSR
标
记
Xcfe164
、
Xedm129
和
STS
标记
Xcnau188
，丰富了
Pm21
基因的分子标记类型。由于
EST
是从
cDNA
文
库中挑选克隆的基因表达序列片断，
STS
是根据单
拷贝
DNA
片段两端的序列设计特异引物而扩增的
特异序列，可以直接获得基因表达的信息，因此利
用上述信息开发的
EST-SSR
和
STS
标记可靠性较
好。本研究获得的上述
3
个标记与
Pm21
基因的遗传
距离均较小，其中
Xcfe164
和
Xedm129
与
Pm21
基因的
遗传距离分别为
3.75 cM
和
1.26 cM
，
Xcinau188
与
Pm21
基因的遗传距离为
0.98 cM
，因此它们在
Pm21
基因的标记辅助选择中具有利用价值，可用于标记
辅助育种。本实验室利用上述
3
个标记进行
Pm21
基
因的辅助选择也证明了它们的可靠性。
3
材料与方法
3.1
小麦材料
本实验所用的供试材料为含抗白粉病基因
Pm21
的小麦种质系
CB033
，普通小麦品种辉县红和
辉县红与
CB033
杂交产生的
F
1
、
F
2
和
F
2:3
家系。抗病
种质系
CB033
由中国农业科学院陈孝研究员惠赠，
国家小麦改良中心泰安分中心保存。
3.2
引物
选用覆盖小麦第六部分同源群上的
258
对引
物，共包括三大类分子标记，即基因组
SSR
、
EST-SSR
和
STS (
袁园园等
, 2010)
。以上所有引物均
由上海生物工程技术有限责任公司合成；
10
×
PCR
Buffer
、
dNTPs
和
Taq
酶等均为大连宝生物工程有限
公司产品。
3.3
小麦白粉病抗性鉴定
利用感病亲本辉县红作为感病对照种成感染
行，以白粉病
E15
菌种在感染行内接种，对
F
1
、
F
2
及
F
2:3
家系材料进行白粉病诱发感染；当辉县红充分
发病时，调查亲本、
F
1
、
F
2
及
F
2:3
家系的白粉病抗性，
分析各后代群体的抗、感分离情况。
白粉病分级标准为
6
级分级标准：
0
型：免疫，植株无病斑；
0
；型：坏死反应，叶片有枯死斑；
1
型：高抗，病斑小
(
一般直径小于
1 mm)
，菌
丝层稀薄可见绿色叶面，偶见较大病斑，但仍透绿，
产孢量极少；
2
型：中抗，叶片病斑直径小于
1 mm
，但菌丝
层较厚，不透绿，能产生一定量孢子；
3
型：中感，叶片病斑多，一般直径大于
1 mm
，
菌丝层厚，产孢量大，但病斑不连片；
4
型：高感，叶片病斑直径大于
1 mm
，菌丝层
厚，产孢量多，病斑连片
(
详见盛宝钦，
1988,
植物
保护
, 1: 49)
，
其中
0
型，
0
；型，
1
型、
2
型为抗病，
3
型、
4
型