分子植物育种
(
网络版
), 2016
年
,
第
14
卷
,
第
1102-1107
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2016, Vol.14, 1102-1107
Copyright © 2016 BioPublisher 1106
3~4 d
,大麦小孢子培养胚胎发生和植株再生显著
增加,甘露醇浓度在
0.3~0.7 mol/L
之间时高温加
饥饿预处理能诱导小麦胚胎发生的结果一致
(
赵
爱菊等
, 2008)
。
不同材料的花药经过甘露醇预处理,对花药愈
伤组织的诱导效果因基因型不同而有所差异
(
武晓
红等
, 2015)
。这可能是因为不同作物的基因型不
同,对甘露醇预处理的效果也有所不同,本研究也
发现,经甘露醇预处理后杂交组合
20040805×P1
、
P1×P2
的花药愈伤组织诱导率可以达到
100.00%
;
组合
P2×20040805
、
P3×P2
、
20040805×P3
也在
90%
以上,
P1×P3
的花药愈伤组织诱导率
(83.33%)
虽没
有其他组合高但也极显著的高于对照,这与武晓红
等人研究结果一致:即甘露醇预处理因不同基因型
而效果不同。
3
材料与方法
3.1
试验材料
试验所用材料为
P2×20040805 (
组合
1)
、
P3×P2
(
组合
2)
、
20040805×P1 (
组合
3)
、
20040805×P3 (
组
合
4)
、
P1×P3 (
组合
5)
、
P1×P2 (
组合
6) 6
个杂交组
合,由石河子大学加工番茄育种课题组提供。试验
材料于
2014
年
9
月种植在石河子大学农学院试验
站温室
,12
月采集加工番茄花药进行试验。室内试
验于
2014-2015
年在石河子大学农学院组织培养
室、温室和
“
新疆特色果蔬生产
”
重点实验室完成。
3.2
试验方法
选择小孢子发育时期为单核靠边期的花蕾,采
集后的花蕾用自来水冲洗
5~6
遍,
70
%的酒精灭菌
30 s
,
15
%
NaOCl
加两滴吐温消毒
10 min(
白玉娥等
,
2015)
,将加工番茄花药接种在不同浓度甘露醇培养
基上,处理时间分别为
1 d
、
2 d
、
4 d
、
6 d
、
8 d
。
预处理培养基为
MS+0.5mg/LNAA(naphthalene
acetic acid,
萘乙酸
)+1 mg/L6-BA (6-
苄基嘌呤
,
6-Benzylaminopurine)+40 g/L
蔗糖
+
甘露醇,甘露醇
浓度设为
0.2 mol/L
、
0.4 mol/L
、
0.6 mol/L
、
0.8 mol/L
。
预处理结束后接种在基本培养基
MS+0.5 mg/L
NAA+1.0 mg/L 6-BA+40 g/L
蔗糖上继续培养,以没
有经过甘露醇预处理作为对照。
pH
值
5.8 (
张丽杰
等
, 2015)
,接种密度为每
50 mL
的三角瓶
6
个花
药,每处理接
6
瓶。培养温度
(25±1)
℃,黑暗培养
7 d
后转至光照培养箱中继续培养,培养温度为
(28±1)
℃,光强
2 000 Lx
,光照时间为
16 h/d
。
25 d
后记录愈伤组织数,统计分析不同处理加工番茄花
药愈伤组织诱导率。
3.3
结果观测与数据处理
愈伤率
(%)=
产生愈伤组织数花药数
/
接种花药
数
×100%
加工番茄愈伤诱导率用
F
检验进行差异显著性
分析,多重比较使用新复极差法,显著水平取
0.05
和
0.01
。
作者贡献
闫丽娟是本研究的实验设计和实验研究的执
行人;闫丽娟完成数据分析,试验结果分析,论文
初稿的写作;马海新、汪斌和樊新民参与实验的执
行;庞胜群是项目的构思者及负责人,指导实验设
计,数据分析,论文写作与修改。全体作者都阅读
并同意最终的文本。
致谢
本研究由科技支疆计划项目
(2014AB004)
和石
河子大学课题
(gxjs2012-yz08)
共同资助。
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