分子植物育种
(
网络版
), 2016
年
,
第
14
卷
,
第
1102-1107
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2016, Vol.14, 1102-1107
Copyright © 2016 BioPublisher 1105
表
5
甘露醇预处理对杂交组合
5
愈伤组织诱导
(%)
Table 5 The callus induction rate mannitol on “Genotype 5”(%)
组合
5
Group 5
1 d
2 d
4 d
6 d
8 d
0.2 mol/L
0.4 mol/L
0.6 mol/L
0.8 mol/L
33.33±0.33 eE
83.33±2.03 aA
22.33±1.20 fF
0.00±0.00 hH
44.33±2.40 dD
64.67±2.33 bB
48.67±1.33 cCD
0.00±0.00 hH
81.00±1.15 aA
44.33±3.48 dD
16.33±0.67 gG
0.00±0.00 hH
51.67±1.67 cC
17.33±0.33 gFG
0.00±0.00 hH
0.00±0.00 hH
34.00±1.53 eE
15.00±2.00gG
0.00±0.00 hH
0.00±0.00 hH
CK
63.89±1.42 bB
注：数字后小写和大写字母分别表示在
5%
和
1%
水平上的差异显著性
Note: The capital and lowercase letlers after digital denote respectively 5% and 1% level of difference significance
表
6
甘露醇预处理对杂交组合
6
愈伤组织诱导
(%)
Table 6 The callus induction rate of mannitol on “Genotype 6”(%)
组合
6
Group 6
1 d
2 d
4 d
6 d
8 d
0.2 mol/L
0.4 mol/L
0.6 mol/L
0.8 mol/L
27.67±0.88 hG
58.67±4.91 eD
0.00±0.00 kJ
0.00±0.00 kJ
72.33±0.33 cB
95.33±2.60 bA
19.67±1.76 iH
0.00±0.00 kJ
100.00±0.00 aA
65.00±1.15 dC
45.00±2.65 fE
0.00±0.00 kJ
34.33±1.33 gF
27.33±2.85 hG
12.67±1.45 jI
0.00±0.00 kJ
33.00±0.00 gFG
14.67±2.33 ijHI
0.00±0.00 kJ
0.00±0.00 kj
CK
16.56±0.87 ijHI
注
:
数字后小写和大写字母分别表示在
5%
和
1%
水平上的差异显著性
Note: The capital and lowercase letlers after digital denote respectively 5% and 1% level of difference significance
2
讨论
对接种花药进行预处理，是在生理生化方面改
变细胞生理状态，形态方面改变小孢子极性分布以
及分裂方式和发育途径，以提高花药的诱导率，通
常采用的方式是高温预处理、低温预处理、预培养
和离心预处理等
(
蒋青青
, 2012)
。有人在低温环境下
对培养前的小孢子进行了甘露醇预处理，将含有单
核期小孢子的花药在含甘露醇的培养基上进行培
养，发现小孢子可进行正常生长，并在培养
30 d
后
得到多核细胞
(Bal
等
, 2005)
。有研究也发现随着甘
露醇浓度的增加，诱导产生的愈伤组织呈现先增后
减的趋势
(
蒋青青
, 2012)
。本试验也通过甘露醇预处
理加工番茄花药，得到较高的愈伤组织诱导率，发
现当浓度为
0.2~0.4 mol/L
时，不同基因型加工番茄
的花药愈伤组织诱导率增有上升趋势，而
0.6~0.8
mol/L
时愈伤组织诱导率呈下将趋势，这与前人研
究结果基本一致。
有人利用甘露醇预处理对花楸体细胞胚进行
诱导，发现未成熟的合子胚经
1 mol/L
甘露醇预处
理
24 h
后
,
接种在添加
0.5 mg/L 6-BA (6-
苄氨基腺嘌
呤
, 6-Benzylaminopurine)
、
0.2 mg/L 2,4-D (2,4-
二氯
苯氧乙酸
, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid)
和
4%
蔗糖
的
MS(Murashige and Skoog medium)
培养基上培养
可产生大量体胚
,
体胚诱导率可达
84%
，显著高于未
经甘露醇预处理的
(
诱导率为
38%) (
沈海龙等
,
2008)
。本研究通过研究甘露醇预处理加工番茄花
药，发现用浓度为
0.2 mol/L
或
0.4 mol/L
的甘露醇
培养基预处理
4 d
时，大部分参试组合的花药愈伤
组织诱导率极显著高于对照，与其结果一致。当甘
露醇浓度达到
0.6 mol/L
时，加工番茄花药愈伤组
织诱导率明显降低，甘露醇浓度达到
0.8 mol/L
时，
加工番茄花药愈伤组织诱导率为
0
，在马铃薯花药
离体培养研究中，甘露醇预处理对愈伤诱导率的影
响也表现为随着处理浓度及天数增加，愈伤组织诱
导率先上升后下降
(
姜丽静等
, 2014)
。
试验表明，甘露醇预处理加工番茄花药浓度较
为适宜时，花药愈伤组织诱导率最高可达
100.00%
，如
0.2 mol/L
、
0.4 mol/L
甘露醇预处理
4 d
时杂交组合
20040805×P1
花药愈伤组织诱导率均能
达到
100.00%
；综合来看，
0.2~0.4 mol/L
甘露醇预
处理加工番茄花药
4d
时对大多数基因型愈伤组织
诱导率都有极显著的提高作用。这与禾谷类作物饥
饿协迫一般采用适当浓度甘露醇处理，
25
℃温度条
件下大麦花药在
0.3~1.5 mol/L
甘露醇溶液下处理
