分子植物育种
(
网络版
), 2016
年
,
第
14
卷
,
第
1102-1107
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2016, Vol.14, 1102-1107
Copyright © 2016 BioPublisher 1103
花药进行预处理,可有效提高花粉愈伤组织的诱导
率。对花药进行预处理的研究目前主要集中在高
温、低温及离心等因素上,而对甘露醇预处理加工
番茄花药的研究较少。在国内的研究报道中,发现
用甘露醇预处理马铃薯、大麦等花药,进行离体培
养在一定范围内可以增加愈伤组织诱导率。
目前通过花药组织培养技术进行单倍体育种
仍未能广泛应用于各种农作物育种中,在番茄上虽
然有花药培养获得单倍体以及双单倍体植株的报
道,但研究表明在栽培番茄的重要基因型中花药培
养技术并不能普遍应用。为了提高番茄花药培养愈
伤组织诱导率,前人主要从培养基类型、激素种
类、基因型等方面进行了研究,而采用甘露醇对花
药进行预处理的报道较少。本研究通过对加工番茄
花药进行不同浓度、不同时间甘露醇的预处理,探
讨甘露醇预处理对加工番茄花药愈伤组织诱导率
的影响,旨在优化加工番茄花药培养体系,提高培
养效率,以期为加工番茄花药培养提供理论依据。
1
结果与分析
甘露醇预处理对加工番茄花药愈伤组织诱导
具有显著影响,不同基因型之间经甘露醇预处理
后,其花药愈伤组织诱导率也有差异。当甘露醇浓
度超过
0.6 mol/L
,无论处理多少天,加工番茄花药
的愈伤组织诱导率均为
0(
表
1~
表
6)
。
1.1
甘露醇预处理对杂交组合
1
愈伤组织诱导的影响
所有处理中只有甘露醇浓度在
0.4 mol/L
、预处
理时间在
4 d
时,杂交组合
1
的花药愈伤组织诱导
率达到最大值
92.33% (
表
1)
,极显著高于对照,其
他处理的愈伤组织诱导率均极显著低于对照,且随
着甘露醇处理浓度及处理时间的增加,甚至无法形
成愈伤组织,如
0.6 mol/L
甘露醇预处理时间达到
6
d
以上时愈伤组织诱导率为
0
,浓度为
0.8 mol/L
时,无论处理几天,均没有愈伤组织形成。
1.2
甘露醇预处理对杂交组合
2
愈伤组织诱导的影响
甘露醇预处理对杂交组合
2
愈伤组织诱导率的
影响与杂交组合
1
有相同趋势
(
表
2)
。即甘露醇浓度
在
0.4 mol/L
时,预处理时间为
4 d
时,杂交组合
2
的花药愈伤组织诱导率极显著高于对照,达到最大
值
94.67%
,其他处理的愈伤组织诱导率均极显著低
于对照,且随着甘露醇处理浓度及处理时间的增
加,甚至无法形成愈伤组织。
1.3
甘露醇预处理对杂交组合
3
愈伤组织诱导的影响
杂交组合
3
对甘露醇预处理比较敏感
(
表
3)
,当
甘露醇浓度为
0.2 mol/L
、
0.4 mol/L
时,预处理时间
4 d
时,花药愈伤组织诱导率均达到
100.00%
,甘露
醇浓度为
0.2 mol/L
预处理
6 d
时花药愈伤组织诱导
率也极显著高于对照。当甘露醇浓度为
0.4 mol/L
时,预处理时间
2 d
时,杂交组合
3
的花药愈伤组
织诱导率与对照相同,其他处理的均极显著低于对
照。当浓度超过
0.8 mol/L
时,无论处理几天,均
没有愈伤组织形成。因此杂交组合
3
采用
0.2 mol/L
甘露醇预处理
4 d
是提高花药愈伤组织诱导率较为
合适条件。
1.4
甘露醇预处理对杂交组合
4
愈伤组织诱导的影响
对于杂交组合
4
,用
0.4 mol/L
甘露醇预处理加
工番茄花药进行愈伤组织诱导具有较好的效果
(
表
4)
。预处理时间为
2 d
、
4 d
时,杂交组合
4
的愈伤
组织诱导率高于对照且差异极显著,预处理
1 d
时
虽愈伤组织诱导率大于对照,但没有显著差异。其
他处理的愈伤组织诱导率均极显著低于对照,且随
着甘露醇处理浓度及处理时间的增加,甚至无法形
成愈伤组织,
0.6 mol/L
甘露醇预处理时间达到
6 d
以上时愈伤组织诱导率为
0
,浓度为
0.8 mol/L
时,
没有愈伤组织形成。
1.5
甘露醇预处理对杂交组合
5
愈伤组织诱导的影响
甘露醇浓度
0.2 mol/L
预处理
4 d
,杂交组合
5
的花药愈伤组织诱导率达到
81.00% (
表
5)
,极显著
高于对照;甘露醇浓度为
0.4 mol/L
、预处理
1 d
时,
花药愈伤组织诱导率达到最大值
83.33%
,与对照差
异极显著,预处理时间在
2 d
时愈伤组织诱导率与
对照相比没有显著差异。其他处理的愈伤组织诱导
率均极显著低于对照,同样高浓度的甘露醇预处理
后杂交组合
5
的花药愈伤组织诱导率为
0
。
1.6
甘露醇预处理对杂交组合
6
愈伤组织诱导的影响
杂交组合
6
的花药不经过甘露醇预处理
(
表
6)
,愈伤组织诱导率较低,只有
16.56%
,有
10
个
处理的愈伤诱导率都极显著高于对照,其中浓度为
0.2 mol/L
预处理
4 d
,愈伤组织诱导率达到了
100.00%
,浓度为
0.4 mol/L
预处理
2 d
愈伤诱导率
达到
95.33%
,两处理间差异不显著。因此
0.2 mol/L
甘露醇预处理
4 d
可以作为杂交组合
6
预处理的最
佳浓度和时间。