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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1577
-
1582
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1577
-
1582
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1581
结束后在
Bio Imaging System (GeneGenins
公司
)
上
观测并拍照和分析，再
3730XL
测序列分析仪
(
美
国
ABI
公司
)
自动检测
SSR
样本，分析
Hardy-Weinberg
和多态性。
3.4
扩增体系及程序
反应体系
10 μL
，其中模板
DNA 30.0 ng
，
Taq
DNA
聚合酶
1.0 U
，
Mg
2+
2.0 mmol/L
，
dNTPs 0.4 mmol/L
，
正反引物各
0.2 μmol/L
。在下列程序下扩增程：
94
℃
预变性
4 min
；
94
℃变性
30 s
，最适退火温度
(
依不同
引物而异
) 40 s
，
72
℃延伸
45s
，
30
个循环；
72
℃延长
10 min
，
4
℃保存
(
张瑞丽等
, 2012)
。
3.5
数据分析
对自动荧光检测获得的结果，采用
GeneMar-
ker1.85
软件包提取
DNA
片段信息，根据
ABI GS500
Standard
，计算出扩增片段大小，获得各位点的扩增
片段。将各位点的扩增进行汇总，利用
Convert 1.31
(Glaubitz et al., 2004)
将结果软件转化成
Popgene
格式，用
Popgene 32 (Yeh et al., 1999, http://www.
ualberta.ca/~ fyeh/popgene.pdf)
进行统计分析。
作者贡献
张瑞丽、白青松是本研究的实验设计和实验研究的执行
人；许玉兰参与实验设计，数据分析，论文写作与修改；田斌、
王大玮参与实验设计，试验结果分析及论文的修改；段安安
是项目的构思者及负责人，指导实验设计。全体作者都阅读
并同意最终的文本。
致谢
本研究在西南山地森林保育与利用省部共建教育部重
点实验室和上海生物工程有限公司完成，得到云南省自然科
学基金项目
(2010CD065)
、云南省教育厅重点项目
(2010Z
-
042)
、国家自然科学基金项目
(31260191)
、云南省教育厅研究
生项目
(2011J053)
和云南省省院省校教育合作咨询共建重点
学科
(211015)
的共同资助。
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