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分子植物育种
(
网络版
)
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online)
1095
种真实性的常规方法主要是利用苗期或成株期形
态学指标进行，周期长且准确性差，特别是鉴定表
型相似的榨菜材料，形态指标难以奏效
(
汪炳良
,
2006,
中国三峡出版社
, pp.6-7)
。近年来，以
DNA
为基础的分子标记技术迅速发展，通过该技术构建
作物品种
DNA
指纹图谱，能够快速准确地鉴定品
种，为作物育种和种子管理提供了极大的便利
(
马琳
等
, 2010)
。目前该技术已广泛应用于水稻
(
从夕汉等
,
2010)
、白菜
(
王笑一等
, 2008)
和甜瓜
(
王美荣等
, 2010)
等作物，有关榨菜品种指纹图谱构建与利用的研究
未见报道。为此，本研究拟利用
SSR
分子标记，构
建
‘
甬榨
1
号
’
、
‘
甬榨
2
号
’
和
‘
甬榨
3
号
’
指纹图谱，
为保护育种者知识产权提供新途径。
1
结果与分析
1.1SSR
多态性引物的筛选与供试榨菜材料的多态
性分析
在
90
对
SSR
中，共筛选到
6
对
SSR
引物
S8005/8006
、
S8021/8022
、
S8051/8052
、
S8071/8072
、
S8125/8126
和
S8159/8160
，在
5
份榨菜材料中稳定
扩增出
6
个差异位点，揭示供试材料的多态性比例
为
6.67% (
图
1)
。
1.2
榨菜品种指纹图谱的构建
组合
6
个
SSR
多态性位点，构建供试榨菜
品种的指纹图谱，结果见表
1
。其中
‘
甬榨
1
号
’
、
‘
甬榨
2
号
’
和
‘
甬榨
3
号
’
的指纹图谱分别是
1
-
0
-
1
-
1
-
0
-
1
、
0
-
1
-
1
-
1
-
0
-
0
和
0
-
1
-
1
-
0
-
1
-
0
，三
个甬榨系列新品种可以通过各自指纹图谱进行
区分，并与市售同类型对照
‘
鲜榨
1
号
’(1
-
0
-
0
-
1
-
0
-
0)
和
‘
余姚缩头种
’(0
-
1
-
1
-
0
-
0
-
0)
鉴别开。根据图谱
出现概率公式计算结果，图谱出现概率为
1/4851495000
，出错概率十分微小，表明利用
SSR
技术构建指纹图谱鉴别和保护甬榨系列新品种
是有效可行的。
图
1 SSR
引物在
‘
甬榨
1
号
’
、
‘
甬榨
2
号
’
、
‘
甬榨
3
号
’
，及对照材料
‘
鲜榨
1
号
’
和
‘
余姚缩头种
’
中的扩增
注
: M: 50 bp DNA ladder marker; 1:‘
鲜榨
1
号
’; 2:‘
余姚缩头种
’; 3:‘
甬榨
1
号
’; 4:‘
甬榨
2
号
’; 5:‘
甬榨
3
号
’;
黑色箭头
:
引物在
1~5
中的差异位点；
A: S8005/8006; B: S8021/8022; C: S8051/8052; D: S8071/8072; E: S8125/8126; F: S8159/8160
Figure 1 SSR amplification of 'Yongzha No.1', 'Yongzha No.2', 'Yongzha No.3', ‘Xianzha No.1’ and ‘Yuyao suotouzhong’
Note: M: 50 bp DNA ladder marker; 1: ‘Xianzha No.1’; 2: ‘Yuyao suotouzhong’; 3: 'Yongzha No.1'; 4: 'Yongzha No.2'; 5: ‘Yongzha
No.3’; Black arrow: Polymorphic fragments of 1~5; A: S8005/8006; B: S8021/8022; C: S8051/8052; D: S8071/8072; E: S8125/8126;
F: S8159/8160