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刘凤栾等: 31 种欧美观赏海棠遗传多样性的 AFLP 分析
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2 讨论
本研究利用 AFLP 分子标记技术，首次对 31
个欧美观赏海棠品种进行了遗传多样性和亲缘关
系分析。在第一类群中，‘ 爱丽’海棠、‘盛花’海棠和
‘莱姆’ 海棠的亲缘关系最近，与多花海棠、‘里赛特’
海棠及‘ 希尔’海棠聚为一亚类，是 31 份种质资源中
亲缘关系最近的一组。此六种海棠均为红色花瓣，
暗示 10 对引物扩增的多态性条带可能与海棠花色
性状相关。而在形态学分类中，前五种海棠均被归
入花红色、单瓣一类，‘ 希尔’海棠被归入花红色、
重瓣一类。因此，对‘ 希尔’ 海棠而言，在分子水平
上与红花单瓣品种亲缘关系较近，但形态上属于红
花重瓣品种，由此表明，‘希尔’ 海棠是由红花单瓣
品种雄蕊瓣化而来，这为观赏海棠重瓣花由单瓣花
进化而来的观点提供了分子生物学论据。
第二类群中，‘ 春雪’海棠、‘道格’ 海棠、‘琥珀’
海棠、‘鲁道夫’ 海棠、‘ 奈微利考伯曼’海棠、‘ 霹雳
贝贝’海棠和‘约翰东’海棠聚为一个亚类，亲缘关系
较近，其中花朵白色、具香味的‘ 春雪’海棠与‘道格’
海棠独成一枝，与其他五种花色偏红(‘ 约翰东 ’除
外) 、无香味海棠分开。此结果验证了‘ 道格’是‘春雪 ’
亲本的关系( 郭翎等, 2009)，也暗示了所扩增多态性
条带可能与花色花香相关；并提示育种者，‘琥珀 ’
海棠、‘鲁道夫’ 海棠、‘ 奈微利考伯曼’海棠、‘ 霹雳
贝贝 ’海棠和 ‘ 约翰东 ’ 海棠是培育具花香新观赏海
棠品种的合适亲本材料。
目前，涉及欧美观赏海棠分子标记分类的研究
不多。在郭翎等(2009)对 72 个苹果属种、杂交种
及品种的 AFLP 分析中，‘ 印第安魔力’ 海棠与‘ 斯普
伦格教授’ 海棠亲缘关系较近，与多花海棠、‘ 印第
安魔力’ 海棠聚在一个类群内。在本研究中，上述
4 个海棠亦聚在同一类群，但与‘ 斯普伦格教授’海
棠亲缘关系较近的为平枝海棠，推测这主要是由两
者供试材料差异较大及 AFLP 选择性扩增引物不
同造成的。‘春雪 ’海棠、‘道格 ’海棠和‘ 绚丽’ 海棠聚
类在第二类群，亲缘关系较近，符合三者亲本之一
均为山荆子(M. baccata)的事实 ( 郑杨等, 2008; 郭
翎等, 2009)。
AFLP 聚类结果所体现的是种质间基因型的差
异，而形态性状表现的是某些功能基因在内部和外
部环境的共同作用下表达的结果(沈红香等, 2011)。
因此，在对引种的欧美观赏海棠品种分类中，AFLP
分子标记分类与传统形态学分类两者之间仍存在
一定的差异。在生产实践中，两种方法 (及其他研究
方法) 需要结合使用，才能使观赏海棠品种分类达到
较合理水平 (陈恒新等, 2007)。
3 材料与方法
3.1 试验材料
2004 年 2 月起，课题组从荷兰、美国引进观赏
海棠品种( 种)46 个，在济南历城西营镇定植。经过
多年的生长适应性调查比对，于 2012 年 6 月初步
筛选出观赏价值高、抗性较好的种质 31 份进行
AFLP 试验(表 2)。
表 2 供试的欧美观赏海棠 31 个品种(种)
Table 2 Introduction of 31 Euramerican ornamental crabapples
编号
No.
品种名称
Cultivar name
编号
No.
品种名称
Cultivar name
1 ‘爱丽’
M . ‘Eleyi’
17 ‘美丽’
M . ‘Gorgeous’
2 ‘草莓果冻’
M . ‘Strawberry Parfait’
18 ‘奈微利考伯曼’
M . ‘Neville Copeman’
3 ‘春雪’
M . ‘Spring Snow’
19 ‘霹雳贝贝’
M . ‘Thunderchild’
4 ‘道格’
M . ‘Dolgo’
20 平枝海棠
M . sargentii
5 ‘冬红’
M . ‘Winter Red’
21 森林苹果
M . sylvestris
6 ‘冬金’
M . ‘Winter Gold’
22 ‘盛花’
M . ‘Profusion’
7 多花海棠
M . floribunda
23 ‘斯普伦格教授’
M . ‘Professor Sprenger’
8 ‘范爱塞尔亭’
M . ‘Van Eseltine’
24 ‘王族’
M . ‘Royalty’
9 ‘粉芽’
M . ‘Pink spire’
25 ‘希尔’
M . ‘Hillieri’
10 ‘红宝石’
M . ‘Red Jade’
26 ‘绚丽’
M . ‘Radiant’
11 ‘红珠宝’
M . ‘Jewelcole’
27 ‘雪坠’
M . ‘Snowdrift’
12 ‘琥珀’
M . ‘Hopa’
28 ‘印第安魔力’
M . ‘Indian Magic’
13 ‘莱姆’
M . ‘Lemoinei’
29 ‘约翰东’
M . ‘John Downie’
14 ‘里赛特’
M . ‘Liset’
30 钟诺斯海棠
M .tschonoskii
15 ‘鲁道夫’
M . ‘Rudolph’
31 ‘珠穆朗玛’
M . ‘Evereste’
16 ‘马凯米克’
M . ‘Makamik’
3.2 试验方法
3.2.1 DNA 提取
随机选取一定量幼嫩叶片，苯酚- 氯仿法提取