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刘晓静等
:
红掌钙结合蛋白基因
AaCBP1
的克隆与低温诱导特性分析
1044
图
2
红掌
AaCBP1
编码的氨基酸序列与其它物种钙结合蛋白序列的比较
Figure 2 Sequence alignment of
Anthurium AaCBP1
amino acid sequence with calcium-binding protein of other species
图
3
AaCBP1
编码的蛋白的保守结构域预测
Figure 3 Conserved domain prediction of
AaCBP1
protein
图
4
红掌
AaCBP1
蛋白与其它物种的钙结合蛋白的系统进化树
Figure 4 Phylogenetic tree of
Anthurium
AaCBP1 and calcium-b-
inding proteins of other species
钙结合蛋白不仅参与植物低温胁迫响应，还在
植物生长发育和多种防御反应中发挥重要作用。在
拟南芥中发现，
CMLs
与植株的病原菌应激反应，
盐胁迫等有关
(Chiasson et al., 2005; Yamaguchi et al.,
2005)
。钙结合蛋白
PCaP2
参与了拟南芥根毛的发
育过程（
Kato et al., 2013
）。在水稻和萝卜中研究发
现，钙结合蛋白在植物胚轴生长和和细胞分裂等生
长发育过程中有重要作用
(Cocucci and Negrini,
1988; Asano et al., 2002)
。红掌钙结合蛋白
AaCBP1
参与了低温胁迫响应，其在红掌生长发育和其它逆
境胁迫中的作用尚不明确，因此，深入研究红掌钙
结合蛋白功能具有深远意义和较高应用价值。
3
材料与方法
3.1
材料
红掌
(
Anthurium andraeanum
) ‘Alabama’
幼苗生
长于浙江省农科院花卉研究开发中心温室中。大肠
杆菌
DH5α
为浙江省农科院花卉研究开发中心实验
室保存。
3.2 RNA
提取、基因克隆
取红掌叶片
6
℃低温胁迫下
0
，
3 h
，
6 h
，
12 h
，
24 h
的样本，利用
Trizol (Invitrogen, USA)
法提取叶
片的
Total RNA
。根据该试剂的说明书进行操作。紫
外分光光度计测定总
RNA 230 nm
、
260 nm
、
280 nm
和
300 nm
吸收值，计算总
RNA
含量，估测其纯度。
然后将
RNA
样本保存于-
80
℃超低温冰箱中备用。
76
Anthurium CBP
331
Arabidopsis CBP
432
Rice CBP
110
Phaseolus CBP
437
Populus CBP
255
Ricinus CBP
426
Corn CBP
Consensus
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113
Anthurium CBP
390
Arabidopsis CBP
511
Rice CBP
175
Phaseolus CBP
500
Populus CBP
319
Ricinus CBP
499
Corn CBP
Consensus
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G
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.
G
182
Anthurium CBP
464
Arabidopsis CBP
584
Rice CBP
246
Phaseolus CBP
572
Populus CBP
386
Ricinus CBP
572
Corn CBP
Consensus
.
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221
Anthurium CBP
503
Arabidopsis CBP
624
Rice CBP
285
Phaseolus CBP
610
Populus CBP
425
Ricinus CBP
612
Corn CBP
Consensus
S
N
T
G
G
G
S
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