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分子植物育种
(
网络版
)
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online)
1175
述阶段
(
王述彬等
, 2001;
陈学军等
, 2009)
。利用分
子标记技术，如：如
RFLP (Prince et al., 1992)
、
RAPD
(
张璐等
, 2003;
陈学军等
, 2006; Sanatombi et al.,
2010;
李永平等
, 2011)
、
AFLP (Lefebvre et al., 2001)
、
SSR (
杜晓华等
, 2006;
陈学军等
, 2012)
、
SRAP (
杜晓
华等
, 2006;
周坤华等
, 2011;
陈学军等
, 2012)
和
ISSR (
杨若林等
, 2005;
陈学军等
, 2007;
孟金贵等
,
2012)
开展了部分辣椒种质资源分析研究工作，取得
了较好成效，但相对滞后于辣椒种质资源的开发和
利用。特别是从辣椒种群角度进行种质资源的起源
演化、挖掘不同栽培种的有的基因和拓宽一年生辣
椒的遗传基础均有十分重要的意义。
本 研 究 以 辣 椒 属 的 一 年 生 辣 椒
(
Cpsicum
annuum
L.)
、中华辣椒
(
Cpsicum chinense
Jacquin)
和
一份观赏用辣椒资源
(
Cpsicum
spp.)
共
30
份辣椒资
源为试材，采用
ISSR
分子标记技术进行辣椒种质资
源的分类鉴定、亲缘关系分析以及不同栽培种遗传
结构分析，为辣椒种质资源的准确鉴定和科学利用
提供相关理论基础。
1
结果与分析
1.1 DNA
提取与
ISSR
引物分析
提取得到的
DNA
经凝胶电泳检测，带型整齐
一致，无降解现象，将
DNA
浓度调整到
40 ng/μL
进
行
ISSR-PCR
反应扩增。从
44
个
ISSR
引物中筛选出
16
个引物
(
表
1)
在辣椒材料中可以稳定清晰的扩增
出条带。
16
条
ISSR
引物在
30
个辣椒样品中共产生
293
条带
(
图
1)
，多样性条带
245
条，多样性位点百分
率
83.62%
，说明所检测的样品具有较高的遗传多样
性。
16
条
ISSR
引物的平均多元率
(Multiplex ration)
为
18/
引物，多样带多元率为
15/
引物。
图
1
引物
38
在
30
个辣椒材料中的
ISSR-PCR
扩增电泳图谱
Figure 1 ISSR-PCR amplification patterns of 30 of
Capsicum
spp. using primer 38
表
1 30
份辣椒资源
16
条
ISSR
引物
PCR
扩增位点的多样性
Table 1 Polymorphism of loci PCR amplified with 16 ISSR primer among the 30
Capsicum
materials
引物
Primer
引物序列
(5'-3')
Sequence (5'-3')
总条带数
No. of total bands
多样性条带数
No. of polymorphic bands
多样性比例
(%)
Percentage of polymorphic bands (%)
ISSR13 AGAGAGAGAGAGAGAGT
24
22
91.67
ISSR14 GAGAGAGAGAGAGAGAT
21
17
80.95
ISSR15 GAGAGAGAGAGAGAGAA
13
9
69.23
ISSR16 AGAGAGAGAGAGAGAGC
20
16
80
ISSR19 CACACACACACACACAG
13
9
69.23
ISSR26 ACACACACACACACACT
21
15
71.43
ISSR27 ACACACACACACACACC
14
9
64.29
ISSR28 ACACACACACACACACG
15
4
26.67
ISSR33 ATGATGATGATGATGATG
17
14
82.35
ISSR34 CTCCTCCTCCTCCTCCTC
12
11
91.67
ISSR36 GACAGACAGACAGACA
13
9
69.23
ISSR38 GATAGATAGACAGACA
38
38
100
ISSR41 GGAGAGGAGAGGAGA
18
18
100
ISSR42 AGAGTTGGTAGCTCTTGATC
15
15
100
ISSR43 CATGGTGTTGGTCATTGTTCCA 15
15
100
ISSR 44 ACTTCCCCACAGGTTAACACA 24
24
100
合计
Total
293
245
平均
Average
18.31
15.31
83.62