Basic HTML Version
分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1396
-
1400
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1396
-
1400
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1398
向旭等
(2005)
对从柑桔与枳属间杂种的基因组
DNA
所获得的
RLK-RGA
，设计简并引物，对柑桔
抗溃疡病材料和感病材料进行分析，获得了一个与
柑橘溃疡病相关的特异性更强的抗性标记－
19h16/Dde1
标记位点，可用于分子标记辅助育种。
Songwattana (2010)
利用
12
对
NBS-LRR RGA
序列
(Deng et al., 2000)
作引物结合限制性酶切对泰
国莱檬杂种
m33
以及父母本
Pan and Nam Hom
的抗
性基因进行了筛选，结果表明标记
Pt9
/Alu1
、
Pt14
/
Bfa1
、
16R1
-
19
/Tru1I
与
M33
和
NamHom lime
的抗性
基因紧密连锁；
Pt9
和
16R1
-
19
的蛋白质分析表明其
属于
non-TIR-NBS-LRR
亚家族，
Pt14
属于
TIR-
NBS-LRR
亚家族。
向旭等
(2009)
利用
3
个与柑橘根结线虫连锁的
NBS-LRR RGA
序列
(Deng et al., 2000)
作标记，对柑
属和枳属的属间杂种“
USDA17
-
47
”进行扩增并酶
切，获得了一个柑橘根结线虫抗性标记。
Gulsen
等
(2010)
利用
2
个
RGA
标记
(Deng et al.,
2000)
结合
SRAP
、
SSR
、
ISSR
、
POGP
、
RGA
及
RAPD
标记建立了一个柑橘连锁图谱。
上述柑橘
RGA
的应用多集中于抗性标记方面。
利用柑橘
RGA
克隆抗病基因尚未见报道。
4
展望
基于
RGA
克隆抗病基因已经得到共识。但利用
RGA
进行抗病基因克隆也存在一些问题：抗病基因
编码的蛋白质由于密码子的简并性，根据抗病基因
产物的蛋白质保守结构域设计的简并引物特异性不
足；同源序列同源性不一，也使得引物设计有偏差；
抗病基因多成簇存在，克隆得到的
RGA
不一定是目
的片段。已有学者对其进行改进，如用高分辨率的
PAGE
胶代替琼脂糖电泳，提高扩增产物的分辨效
率
(Rivkin et al., 1999)
。也可直接将
RGA
转入柑橘
植株，观察转基因植株的表现，进而分析
RGA
的功
能，或者根据
RGA
序列设计特异性引物，转换为
CAPS
标记，可用于分子标记辅助育种。与水稻、小
麦等作物相比，柑橘
RGA
的研究较为薄弱，对其
利用也研究较少。柑橘基因组测序的完成为在全基
因组水平上大规模挖掘
RGA
提供了新契机。在后
基因组时代，柑橘
RGA
将会在柑橘抗病研究中发
挥更大的作用。
作者贡献
张艳芳是本综述的主要执行人；温寿星、黄镜浩、包榕
负责本综述的后期修改；蔡子坚是本综述的构思者。全体作
者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由福建省农业科学院博士科研启动基金项目
(2010BS
-
2)
和福建省自然科学基金
(2011J05052)
共同资助。
感谢两位匿名的同行评审人的评审建议和修改建议。
参考文献
An R., 2010, Cloning and analysis of NBS type resistance gene
analogs in citrus, Thesis for M.S., Hunan Agricultural
University, Supervisor: Yi T.Y. and Deng Z.N., pp.17-27
(
安然
, 2010,
柑橘
NBS
类抗病同源序列的克隆与分析
,
硕士学位论文
,
湖南农业大学
,
导师
:
易图永
,
邓子牛
,
pp.17-27)
Bakker E., Borm T., Prins P., van der Vossen E., Uenk G., Arens
M., de Boer J., van Eck H., Muskens M., Vossen J., van
der Linden G., van Ham R., Klein-Lankhorst R., Visser R.,
Smant G., Bakker J., and Goverse A., 2011, A genome-
wide genetic map of NB-LRR disease resistance loci in
potato, Theor. Appl. Genet., 123(3): 493-508 http://dx.doi.
org/10.1007/s00122-011-1602-z PMid:21590328 PMCid:
3135832
Behlau F., Canteros B.I., Minsavage G.V., Jones J.B., and
Graham J.H., 2011, Molecular Characterization of Copper
Resistance Genes from
Xanthomonas citri
subsp.
citri
and
Xanthomonas alfalfae
subsp.
Citrumelonis
, Appl. Environ.
Microbiol., 77(12): 4089-4096
http://dx.doi.org/10.1128/
AEM.03043-10 PMid:21515725 PMCid:3131652
Brotman Y., Silberstein L., and Kovalski I., 2002, Resistance
gene homologues in melon are linked to genetic loci
conferring disease and pest resistance, Theor. Appl. Genet.,
104(6-7): 1055-1063 http://dx.doi.org/10.1007/s00122-
001-0808-x PMid:12582612
Deng Z., and Gmitter F.G.Jr., 2003, Cloning and characteri-
zation of receptor kinase class disease resistance gene
candidates in Citrus, Theor. Appl. Genet., 108(1): 53-61
http://dx.doi.org/10.1007/s00122-003-1410-1 PMid:
13679986
Deng Z., Huang S., Ling P., Chen C., Yu C., Weber C.A., Moore
G.A., and Gmitter F.G. Jr., 2000, Cloning and characteri-
zation of NBS-LRR class resistance-gene candidate seque-
nces in citrus, Theor. Appl. Genet., 101: 814-822 http://dx.
doi.org/10.1007/s001220051548
Dilbirligi M., and Gill K.S., 2003, Identification and analysis of
expressed resistance gene sequences in wheat, Plant Mol.
Biol., 53(6): 771-787
http://dx.doi.org/10.1023/B:PLAN.
0000023663.55701.5f PMid:15082925
Ding G.H., 2004, Study on isolation of resistance gene analog