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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1383
-
1389
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1383
-
1389
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1383
研究报告
Research Report
杜鹃花类菌根真菌硝态氮代谢
SSH
文库构建及分析
孙秋玲
1,2
,
张春英
1
,
戴思兰
2
1.
上海市园林科学研究所
,
上海
, 200232
2.
北京林业大学园林学院
,
国家花卉工程技术研究中心
,
北京
, 100083
通讯作者
:
mayzhang55@163.com; silandai@sina.com
作者
分子植物育种
, 2012
年
,
第
10
卷
,
第
52
篇
doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0052
收稿日期：
2012
年
09
月
03
日
接受日期：
2012
年
10
月
19
日
发表日期：
2012
年
12
月
01
日
这是一篇采用
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,
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引用格式
(
中文
)
：
孙秋玲等
, 2012,
杜鹃花类菌根真菌硝态氮代谢
SSH
文库构建及分析
,
分子植物育种
(online) Vol.10 No.52 pp.1383-1389 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.
10.0052)
引用格式
(
英文
)
：
Sun et al., 2012, Construction and Analysis of SSH cDNA Library of Ericoid Mycorrhizae Fungus Under Nitrate Induction, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online)
(Molecular Plant Breeding) Vol.10 No.52 pp.1383-1389 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0052)
摘
要
本研究选取铵态氮下生长及硝态氮诱导的杜鹃花类菌根真菌为材料，利用抑制性差减杂交技术成功构建了硝态氮
诱导下杜鹃花类菌根真菌的正向差减
cDNA
文库。挑取
300
个阳性克隆进行测序，获得
223
条单一序列。经
Blast
分析，其
中
92
条序列为功能已知序列，
53
条序列为未知功能序列，
23
条序列能够找到相似性较高基因；
55
条序列未找到匹配基因。
功能已知基因涉及能量代谢、物质合成与代谢、抗性、物质转运、信号转导等代谢活动。其中发现了硝酸盐转运蛋白、硝酸
还原酶、亚硝酸还原酶、氨基酸转运蛋白、磷酸转移酶等硝酸盐代谢相关基因，为进一步研究
ERM
真菌硝态氮代谢提供了
分子基础。
关键词
杜鹃花类菌根真菌
;
硝态氮
;
抑制性差减杂交
Construction and Analysis of SSH cDNA Library of Ericoid Mycorrhizae
Fungus Under Nitrate Induction
Sun Qiuling
1,2
, Zhang Chunying
1
, Dai Silan
2
1. Shanghai Landscape and Gardening Research Institute, Shanghai, 200232, P.R. China;
2. College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, National Engineering Research Center for Floriculture, Beijing, 100083, P.R. China
Corresponding author, mayzhang55@163.com; silandai@sina.com;
Authors
Abstract
The ericoid mycorrhizal fungi cultivated in the ammonium and induced by nitrate as experimental material, this study
constructed a forward subtractive cDNA library to study the nitrate-induced genes in ericoid mycorrhizal fungi by suppression
subtractive hybridization. We randomly picked 300 clones for sequencing, eventually won 223 single sequences. Similarity search by
BLAST indicated that 92 uniESTs should be known function sequences, whereas 53 uniESTs might be unknown proteins and
putative proteins, which were unmatched sequences, while the remaining 23 sequences were highly matched. The known function
genes primarily involves in energy metabolism, material synthesis and metabolism, biological resistance, membrane transfer, and
signal transduction and so on, and some genes related to nitrate metabolism were found, such as nitrite reductase, nitrate transporter,
nitrite reductase, and amino acid permease and so on, These genes may provide a basis for further studies on nitrate metabolism of
ericoid mycorrhizae fungus.
Keywords
Ericoid mycorrhizal fungi; Nitrate; Suppression subtractive hybridization
研究背景
氮作为植物的生命元素，不仅是生物有机体的
组成成分，还参与酶及叶绿素的合成，植物的生长
和产量完全依赖于土壤中的氮含量，尤其是硝态
氮、铵态氮等有效氮含量
(Gobert and Plassard,
2008)
。增强植物对于氮素的利用能力和效率，对于
植物生长和整个生态系统的稳定性有重要的意义。
大多数杜鹃花科植物自然生境土壤为酸性土，通常
认为在
PH
低于
5.5
的土壤中硝化作用几乎是可以
忽略不计的
(Paul and Clark, 1989)
，酸性土壤中硝态
氮不可利用
(Kosola and Workmaster, 2007)
。而
1919
-
1971
年间所发表的有关杜鹃花科重要植物蓝
莓
(
Vaccinium macrocarpon
)
的研究论文均认为：当施
以硝态氮时，蓝莓的生长量比无氮源条件下大，甚