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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1061
-
1066
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1061
-
1066
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1061
研究报告
A Letter
苍山奇蝶捧瓣蝶化
MADS
基因筛选
田璐
1
,
武芸芸
1
,
朱永平
2
,
和凤美
1
1
云南农业大学园林园艺学院
,
昆明
, 650201
2
云南农业大学农学与生物技术学院
,
昆明
, 650201
通讯作者
: hefengmei918@126.com;
作者
分子植物育种
, 2012
年
,
第
10
卷
,
第
8
篇
doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0008
收稿日期：
2011
年
02
月
17
日
接受日期：
2012
年
02
月
29
日
发表日期：
2012
年
03
月
19
日
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引用格式
(
中文
)
：
田璐等
, 2012,
苍山奇蝶捧瓣蝶化
MADS
基因筛选
,
分子植物育种
(online) Vol.10 No.8 pp.1061-1066 (doi: 10.5376/mpb. cn.2012.10.0008)
引用格式
(
英文
)
：
Tian et al., 2012, Screening of MADS genes for llip-like petals in
Cymbidium tortisepalum
‘Cang Shan Qi die’, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant
Breeding) Vol.10 No.8 pp.1061-1066 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0008)
摘
要
为了克隆兰花捧瓣蝶化的相关基因，揭示蝶化形成的分子机理，本试验用总
RNA
提取试剂盒提取
‘
苍山奇蝶
’
蝶化
捧瓣、正格花捧瓣的总
RNA
，经
mRNA
纯化试剂盒纯化后，采用
Smart
技术逆转录
cDNA
，经
Rsa
I
酶切后，以蝶化捧瓣酶
切
cDNA
作为检测子，正格花酶切
cDNA
作为驱赶子，成功构建了
‘
苍山奇蝶
’
蝶化捧瓣与其正格花捧瓣之间差异表达
cDNA
文库。生物信息学分析表明：文库包含
MADS
、假设蛋白、
GenBank
中未匹配蛋白、储存蛋白以及其它等
5
类差异表达基
因。其中
4
个基因归为
MADS
家族中的
B
亚族。系统进化树分析表明：
2
个
MADS
基因归入
DEF
基因同亚家族，另
2
个
MADS
归为
PI
基因。这些
MADS
基因的获得为
‘
苍山奇蝶
’
捧瓣蝶化相关基因克隆和功能解析奠定了基础。
关键词
莲瓣兰；抑制消减杂交；生物信息学；差异基因
Screening of MADS Genes for Lip-like Petals in
Cymbidium tortisepalum
‘Cang
Shan Qi die’
Tian Lu
1
, Wu Yunyun
1
, Zhu Yongping
2
, He Fengmei
1
1 College of Horticulture and Landscape, Yunnan Agricultural University, Kunming, 650201
2 College of Agriculture and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, Kunming, 650201
Corresponding author: hefengmei918@126.com;
Author
Abstract
In this study, to analyze the molecular mechanism of the formation of the lip-like petals and isolate the lip-like associated
genes, total RNAs were extracted from lip-like petals and normal petals in ‘Cang Shan Qi die’ by using plant total RNA extraction
reagent. Then mRNA were purified and transcribed into cDNA by SMART. After
Rsa
I enzyme digested cDNA , using cDNA
fragments from the lip-like petals as tester and cDNA fragments from the normal petals as driver, Suppression Subtractive
Hybridization was applied to construct a differentially expressed cDNA library. Bioinformatics analysis shows there are 5 categories
of different differentially expressed genes in this cDNA library, which are MADS-box transcription factors, hypothetical protein,
non-matched protein in GenBank, storage proteins and others. 4 of them are B-class genes in MADS gene family. Phylogenetic
results show that 2 MADS genes belong to EDF genes, and the other 2 belong to PI genes. These MADS genes provide a basis for
cloning lip-like -associated genes in ‘Cang Shan Qi die’ as well as studying their function.
Keywords
Cymbidium tortisepalum
, Suppression subtractive hybridization, Bioinformatics, Differentially expressed genes
研究背景
兰花是一个大家族，总称兰科植物
(Orchldaceae)
。
兰花花结构高度特化，具有花瓣状的萼片和特异的
唇瓣以及各种奇异状的花型，尤以蝶花、奇花为著，
并于
90
年代后期开始逐步取代正格的瓣型花、素花
成为兰花市场的主流，常是每株售价上百逾万。环