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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1542
-
1548
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1542
-
1548
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1544
图
2 PCR
阳性植株的
RT-PCR
检测
注
: M: DL2000 marker; 1:
阳性对照
; 2:
阴性对照
; 3~8:
抗
性植株
Figure 2 RT-PCR analysis of PCR-positive plants
Note: M: DL2000 marker; 1: Positive control; 2: Negative
control; 3~8: Regenerated plants
检测发现，低温胁迫
0~4 d
时，
CK
、
L2
株系的
MDA
含量一直呈上升趋势，而
L1
株系呈先上升后
下降趋势，
1 d
时
L1
株系
MDA
含量达到最高值，出
现这种情况可能是由于，低温胁迫
1 d
时，转化美女
樱的自身抵抗机制还没能完全启动，而在胁迫
4 d
时
由于
OsLsi1
基因的转化对土壤中硅的大量吸收，使
硅起到保护植物的作用，胁迫
4~7 d
时，
CK
、
L1
、
L2
株系的
MDA
含量也一直呈上升趋势，但
CK
、
L2
株
系
MDA
含量都明显高于
L1
株系
(
图
5)
。与对照相
比较，
L2
株系的
MDA
含量明显高于
L1
株系，由此
可以推测，转
OsLsi1
基因美女樱的抗寒能力比转
OsLsi2
基因美女樱抗寒能力高。
通过多重比较分析发现
(
表
1)
，在低温胁迫
0 d
时，
CK
与
L2
株系差异并不显著，而
L1
株系与
CK
、
L2
株系相比差异性显著。在胁迫
1 d
时，三个株系
差异性均不显著，而在胁迫
4 d
以后一直保持着显
著地差异性。
由此说明，
OsLsi1
基因的导入可以显著降低低
温胁迫的美女樱
MDA
的含量，植物的抗寒能力有所
提高；相反，
OsLsi2
基因的导入可以提高低温胁迫美
女樱的
MDA
的含量，使植物抗寒能力降低，间接证
明硅可以提高植物抗寒能力。
1.3.2
低温胁迫下转基因美女樱脯氨游离酸含量的
分析
游离脯氨酸是一种小分子渗透调节物质，是水
溶性最大的氨基酸。植物在逆境胁迫条件下，均积累
高水平的脯氨酸
(
朱虹等
, 2007)
。
检测发现，低温胁迫
0~4 d
时
, CK
、
L1
株系的游
离脯氨酸的含量一直呈上升趋势，
4 d
时
CK
株系达
到最高值，之后呈下降趋势；胁迫
4~7 d
时
, L1
株系
的游离脯氨酸含量一直是上升趋势，且在
7 d
出现
峰值，而
L1
、
L2
株系的游离脯氨酸的含量则呈下
降趋势
(
图
6)
。与对照组相比较，
L1
株系的游离脯氨
酸含量明显高于
L1
株系，由此可以推测，转
OsLsi1
基因美女樱的抗寒能力比转
OsLsi2
基因美女樱抗
寒能力高。
经过多重比对发现
(
表
2)
，低温胁迫
0 d
时，
CK
株系与
L1
、
L2
株系呈现显著差异，
L1
与
L2
之间差
异性不显著；在胁迫
1 d
、
4 d
、
7 d
时，三个株系都达
到差异显著水平。由此推断
OsLsi1
基因可以提高美
女樱体内游离脯氨酸的含量，从而提高植物的抗寒
能力；
OsLsi2
基因的转入降低了游离脯氨酸的含量，
使植物抗寒能力降低。
1.3.3
低温胁迫下转基因美女樱
SOD
活性的分析
超氧化物歧化酶
(SOD)
是一种植物体内重要的
酶类，其活性与植物的抗寒能力密切相关，可以反
映出物对逆境的适应
(
史雨刚等
, 2007)
。
检测发现，低温胁迫
0~4 d
时，
CK
、
L1
、
L2
株
系的
SOD
活性都呈上升趋势；胁迫
4~7 d
时
L1
株系
一直是上升趋势，且在
7 d
出现峰值，而
L1
、
L2
株
系的
SOD
活性则呈下降趋势。与对照相比较，
L1
株系的
SOD
活性明显高于
L2
株系，由此可以推测，
转
OsLsi1
基因美女樱的抗寒能力比转
OsLsi2
基因
美女樱抗寒能力高
(
图
7)
。
经过多重比对发现
(
表
3)
，低温胁迫
0 d
时，
CK
与
L1
、
L2
株系呈现显著差异；低温胁迫
1
、
4
、
7 d
时，
CK
与
L1
、
L2
株系也呈现显著差异，
L1
和
L2
株系
在低温胁迫
4 d
后
SOD
活性均呈现下降趋势。由
此分析可以说明，
OsLsi1
基因可以使美女樱
SOD
酶系统不受破坏，从而提高美女樱对低温的抵抗
力；而
OsLsi2
基因导致
SOD
活性降低，使美女樱抗
寒能力降低。
1.3.4
低温胁迫下转基因美女樱
POD
活性的分析
POD
与
SOD
相似，也是植物防御膜质过氧化
机制中其重要作用的保护酶，有研究表明，
POD
的
活性与植物抗寒能力呈正相关。
检测发现，低温胁迫
0~4 d
时，
CK
株系
POD
活
性呈先上升后下降趋势，
L1
株系的
POD
活性呈上
升趋势，而
L2
株系则一直保持下降趋势；胁迫
4~7 d
时
L1
株系一直呈上升趋势，且在
7 d
出现峰值，而
L1
、
L2
株系的
POD
活性则呈下降趋势。与对照相比
较，
L1
株系的
POD
活性明显高于
L2
株系，由此
可以推测，转
OsLsi1
基因美女樱的抗寒能