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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1526
-
1534
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1526
-
1534
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1529
的自交后代中获得
TCR01
位点纯合的
3
株个体
(
编号
为
B1S1,B1S2
和
B1S3)
，即为
NILs
；从
B2
的自交后代
中，获得
2
个
NILs (
编号为
B2S1
和
B2S2)
；从
C1~C4
的自交后代中筛选出
15
株纯合个体。
为获得所有
SSR
位点与‘
91
-
12B
’一致的近等
基因系，对
C1~C4
的自交后代
15
株个体进行基因组
背景分析。分析结果只有
2
株个体恢复了‘
91
-
12B
’
基因组
(
图
1)
，即
2
个
NILs (
编号为
C2S1
和
C3S1)
。
表
2 BC
3
F
1
代
55
株个体的前景和背景选择以及
BC
3
F
2
代植株的选择
Table 2 Background selection of the foreground-selected 55 BC
3
F
1
and their BC
3
F
2
plants
BC
3
F
1
代个体的第一次背景选择
First background selection of BC
3
F
1
individuals
BC
3
F
1
代个体的第二次背景选择
Second background selection of
BC
3
F
1
individuals
选择的
BC
3
F
1
个体
Selected BC
3
F
1
individual
BC
3
F
2
的背景选择以及选出的近等
基因系
Selection of BC
3
F
2
and selected NILs
植株数
Number
of plants
轮回亲本基因组
含量
(%)
RPG content (%)
植株数
Number
of plants
轮回亲本基因组
含量
(%)
RPG content (%)
植株数
Number
of plants
选出的近等基因系
Selected NILs
10
100
2
100
B1
25
B1S1, B1S2, B1S3
12
96.3
4
98.1
B2
25
B2S1, B2S2
2
92.6
4
96.3
C1
20
5
85.2
7
a
94.3
C2
20
C2S1
26
a
<74.1
12
a
<92.4
C3
20
C3S1
平均
94.6
C4
20
Average
注
: a:
淘汰的植株数
; RPG:
轮回亲本基因组
Note: a: The number of the discarded plants; RPG: Recurrent parent genome
1.3
近等基因系的评价
为了筛选出抗根肿病的最优近等基因系，对所
获得的
7
个
NILs
从抗病性、分子水平、主要农艺性
状进行了鉴定。
1.3.1
分子评价
除了用于前景和背景选择的位于
A3
染色体的
9
个标记以外，另选用
CRb
基因所在
A3
染色体的
6
个
SSR
标记进行了遗传背景分析
(
图
3)
。这些标记覆盖
了
A3
染色体的
135.4 cM
。分析表明所有
NIL
在
CRb
基
因附近区域均插入有‘
CR Shinki DH
’系的约
6.9~
7.4 cM
长度。此外，
B1S2
和
B1S3
还含有‘
CR Shinki
DH
’系的
sau_nm235
。因此，选择插入目标基因区域
最少的
B1S1
、
B2S2
和
C3S1
进行了抗病性和大白菜
结球相关性状的测定。
1.3.2
抗病性鉴定
在根肿菌接种
6
周后，观察根肿病发病情况。
供试的
25
株‘
91
-
12A
’和‘
91
-
12B
’均表现为
3
级感
病，‘
CR Shinki DH
’系
25
株均表现为抗病。
B1S1
、
B
2
S
2
和
C
3
S
1
及其与‘
91
-
12A
’配制的杂交组合均表
现为抗病，未发生分离。该结果证明这些
NILs
中插
入的抗根肿病基因
CRb
达到了纯合。因此，与
CRb
的侧翼标记
TCR01
和
TCR09
能够在前景选择中发挥
准确且高效的作用。
1.3.3
主要农艺性状鉴定
以‘
91
-
12B
’和‘
91
-
12B
×
91
-
12A
’为对照，对
主要农艺性状进行考察，结果表明：
B1S1
、
B2S2
和
3S1
‘
91
-
12B
’，以及各杂交组合与‘
91
-
12B
×
91
-
2A
’
之间在接球相关性状上差异不显著
(
表
3)
。说明通过
MAS
方法选育的
NILs
不仅恢复了轮回亲本
‘91
-
12B’
的主要农艺性状，而且其杂交组合与原组合
‘91
-
1-
2B×91
-
12A’
亦无显著差异。
2
讨论
与传统育种方法选育抗病材料相比，抗病基因
连锁标记的应用不仅可以避免错误选择感病个体的
可能性，也可以在植物生长发育的任何时期进行选
择。有研究证明人工接菌的外界环境，如水分、光照、
pH
、温度等，易影响根肿病抗病性的鉴定
(Hamilton
and Crete, 1978)
。本试验在没有接菌的条件下，利用
CRb
的两个侧翼标记在苗期对各世代进行了前景选
择。结果证明所选育的
NILs
均表现出对根肿菌生理