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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1214
-
1217
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1214
-
1217
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1217
3.3 RNA
质量与浓度检测
取
1 µL
所提取的总
RNA
，用
ND
-
1000
核酸蛋
白定量仪检测浓度及纯度。取
2 µL
含有
6
×
Loading
Buffer RNA
进行
1.0%
琼脂糖凝胶电泳检测分析。
3.4 RT
-
PCR
检测
按照
Promega
公司
M-MLV
反转录酶操作手册
进行。以杨树
UBQ
基因
(BU879229)
序列进行引物设
计，
5'
引物
P1
：
5'
-
GTTGATTTTTGCTGGGAAGC
-
3'
和
3'
引物
P2
：
5'
-
GATCTTGGCCTTCACGTTGT
-
3'
(
北京鼎国公司合成
)
。扩增条件为
94
℃
5 min
；
94
℃
20 s
→
58
℃
20 s
→
72
℃
20 s
，
35
个循环；
72
℃
2 min
。取
5 µL RT-PCR
产物进行
1.0%
琼脂糖凝胶
电泳检测。
作者贡献
周祥明是项目的构思者及负责人，同时指导实验设计，
数据分析，论文初稿的写作与修改；宋建负责材料的水培、
处理、取样、
RNA
提取检测及论文修改工作；郝志愚完成
数据分析；王姝进行试验结果分析。全体作者都阅读并同意
最终的文本。
致谢
本研究由天津市应用基础及前沿技术研究计划
(10JCYBJC09500)
、国际科技合作项目
(2011DFA30990)
和北
京林业大学林木育种国家工程实验室开放课题项目
(FOP2010
-
13)
资助；作者感谢天津市农业科学院中心实验室
王永、兰青阔在
RNA
检测方面给予的帮助，《天津农业科
学》编辑部梁凤莲在论文撰写中给予的宝贵建议。
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