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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1191
-
1198
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1191
-
1198
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1191
研究报告
A Letter
适于云南小麦断穗和抗条锈病引物的
SSR-PCR
反应的体系优化
周国雁
1
,
李文春
2
,
伍少云
1
1.
云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
,
云南省农业生物技术重点实验室
,
农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室
,
昆明
, 650205
2.
云南中医学院
,
昆明
, 655000
通讯作者
:
caiyunwu205cn@yahoo.com.cn
作者
分子植物育种
, 2012
年
,
第
10
卷
,
第
27
篇
doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0027
收稿日期：
2012
年
02
月
28
日
接受日期：
2012
年
04
月
26
日
发表日期：
2012
年
06
月
12
日
这是一篇采用
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引用格式
(
中文
)
：
周国雁等
, 2012,
适于云南小麦断穗和抗条锈病引物的
SSR-PCR
反应的体系优化
,
分子植物育种
(online) Vol.10 No.27 pp.1191-1198 (doi:10.5376/
mpb.cn.2012.10.0027)
引用格式
(
英文
)
：
Zhou et al., 2012, Optimization of SSR-PCR Reaction System Adapted to Primers for Brittle Rachis and Stripe Rust Resistance in
Triticum aestivum ssp
yunnanense
King, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.10 No.27 pp.1191-1198 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0027)
摘
要
为开展云南小麦
(
Triticum aestivum ssp yunnanense
King)
断穗、抗条锈病基因的分子辅助标记鉴定，选择其新鲜幼
嫩的无病斑叶为材料，研究了
PCR
反应体系中
Mg
2+
、
dNTP
、模板
DNA
、引物和
Taq
酶的浓度对其断穗、抗条锈病
SSR
引物扩增结果的影响，构建起了适宜其断穗、抗条锈病基因分子标记的最佳
PCR
反应体系，该体系为
Mg
2+
1.8 mmol/L
、
dNTP 0.25 mmol/L
、模板
DNA 30 ng
、引物
0.1 μmol/L
、
Taq
DNA
聚合酶
1.5 U
、再加
ddH
2
O
补至
25 μL
。此反应体系有良好
的稳定性，将为开展云南小麦断穗和抗条锈病基因的
SSR
标记研究提供分子生物学基础。
关键词
云南铁壳麦
;
断穗
;
抗条锈病
; SSR; PCR
反应体系优化
Optimization of SSR-PCR Reaction System Adapted to Primers for Brittle
Rachis and Stripe Rust Resistance in
Triticum aestivum ssp yunnanense
King
Zhou Guoyan
1
, Li Wenchun
2
, Wu Shaoyun
1
1. Biotechnology and Germplasm Resources Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences; Yunnan Provincial Key Lab of Agricultural Biotechnology;
Key Lab of Southwestern Crop Gene Resources and Germplasm Innovation, Ministry of Agriculture, Kunming, 650205
2. Yunnan University of Traditional Chinese Medicine, Kunming, 655000
Corresponding author, caiyunwu205cn@yahoo.com.cn;
Authors
Abstract
In order to appraise the molecular marker of brittle rachis gene and resistance stripe rust gene, fresh, tender and healthy
leaves were employed to investigate the effect of concentration of Mg
2+
, dNTP, template DNA, primer and the level of Taq-DNA
polymerase on the brittle rachis and the result of increasing SSR primer of resistance stripe rust of
Triticum aestivum ssp yunnanense
King. The optimized SSR reaction system was established based on the following conditions: Mg
2+
1.8 mmol/L, dNTP 0.25 mmol/L,
template DNA 30 ng, primer 0.1 μmmol/L, 1.5 U Taq-polymerase and ddH
2
O was added to make a final volume of 25 μL. This
system can offer the foundation in molecular biology research of brittle rachis gene and resistance stripe rust gene in
Triticum
aestivum ssp yunnanense
King due to its better stability.
Keywords
Triticum aestivum ssp yunnanense
King; Brittle rachis; Resistance of stripe rust; SSR; Optimization of PCR reaction system
研究背景
云南小麦
(
Triticum aestivum ssp yunnanense
King, AABBDD, 2n=6x=42)
，也俗称云南铁壳麦，
是中国西部特有的三种小麦种质资源之一。其显著
地有别于普通小麦种的特点不仅是包壳紧、不易脱
粒，因而抗穗上发芽和鸟害
(
曾学琦等
, 1989,
云南
农业科技
, (5): 3-6;
董玉琛等
, 1981;
伍少云和奉有
壁
, 2001)
，而且还有成熟时小穗轴节片受外力影响
易下节位断裂的原始特性。这种断裂方式也称楔型
(
陈庆富
, 1999;
王志清和郑有良
, 2004; Watanabe et
al., 2005)
断裂，是断穗发生在小穗与主穗轴连接点
的上方，断裂的小穗与自己的小穗轴相连。不过，
其断裂程度不及西藏半野生小麦的自然脱落
(
王志
清和郑有良
, 2004;
邵启全等
, 1980;
陆平
, 2000,
西
藏农业科技
, 22(2): 23-27)
。虽然，自其在
1937
年被
金善宝教授发现并在
1959
年被确定为普通小麦种