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(
付蓉蓉等
, 2011,
番茄黄化
曲叶病的
Ty
-
1
和
Ty
-
3
抗性基因的
PCR
鉴定
,
分子植物育种
(online) Vol.9 No.91 pp.1647-1653 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0091))
1651
表
3
抗性基因及鉴定所用引物序列
Table 3 The resistance gene and the sequences of primers used in the identification
基因名称
引物
序列
Gene name
Primer
Sequences
Ty
-
1
CAPS1 F
5'
-
TAATCCGTCGTTACCTCTCCTT
-
3'
CAPS1 R
5'
-
CGGATGACTTCAATAGCAATGA
-
3'
Ty
-
2
SCAR2 F
5'
-
TGGCTCATCCTGAAGCTGATAGCGC
-
3'
SCAR2 R
5'
-
AGTGTACATCCTTGCCATTGACT
-
3'
Ty
-
3
SCAR3 F
5'
-
GGTAGTGGAAATGATGCTGCTC
-
3'
SCAR3 R
5'
-
GCTCTGCCTATTGTCCCATATATAACC
-
3'
表
4
不同抗病材料抗性基因的基因型及其标记所扩增产物的长度
Table 4 The genotypes of materials with different resistant gene,and the amplified fragments length by the markers
Ty
-
1
基因
Ty
-
2
基因
Ty
-
3
基因
基因型
扩增产物
(bp)
基因型
扩增产物
(bp)
基因型
扩增产物
(bp)
Gene type
Amplified product (bp)
Gene type
Amplified product bp)
Gene type
Amplified product (bp)
Ty
-
1
/
Ty
-
1
303, 95
Ty
-
2/Ty
-
2 900
Ty
-
3/Ty
-
3 650
Ty
-
1
/
ty
-
1
398, 303, 95
Ty
-
2/ty
-
2
900, 800
Ty
-
3/ty
-
3
650, 320
ty
-
1
/
ty
-
1
398
ty
-
2/ty
-
2
800
ty
-
3/ty
-
3
320
延伸
10 min
。然后取
PCR
产物于
1.5%
琼脂糖凝胶电
泳，观察并用凝胶成像系统拍照保存。
3.4
田间自然发病验证
2010
年
9
月
3
日于浦江基地大棚内发现第一株
有番茄黄化曲叶病症状的番茄材料，然后每天赶虫
一次，使番茄苗均匀受毒。一个月后统计番茄材料
的抗、感病情况。依据
Lapidot
等
(Lapidot et al., 2001)
的抗性分级方法，计算病情指数，公式如下
:
(
)
病级 各级植株数
病情指数＝
调查总株数 最高病级
作者贡献
付蓉蓉，刘杨和陈火英是本研究的实验设计和实验研究
的执行人；付蓉蓉完成数据分析，论文初稿的写作；付蓉蓉
和刘杨参与实验设计，试验结果分析；陈火英是项目的构思
者及负责人，指导实验设计，数据分析，论文写作与修改。
全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由上海市科技兴农重点攻关项目
(
沪农科攻字
(2007)
第
5
-
1
号
)
和上海市重点学科建设项目
(B209)
共同资
助。作者感谢研究生李翔同学在本实验过程中的技术支持和
有益的建议。
参考文献
Anbinder I., Reuveni M., Azari R., Paran I., Nahon S., Shlomo
H., Chen L., Lapidot M., and Levin I., 2009, Molecular
dissection of Tomato leaf curl virus resistance in tomato
line TY172 derived from
Solanum peruvianum
, Theor.
Appl. Genet., 119(3): 519-530
Boulton M.I., 2003, Geminiviruses: major threats to world
agriculture, Annals of Applied Biology, 142(2): 143
Hanson P.M., Green S.K., and Kuo G., 2006,
Ty
-
2
a gene on
chromosome 11 conditioning geminivirus resistance in
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He Z.F., Yu H., and Luo F.F., 2005, The molecular
characteristics of DNA-A of tomato leaf curl Guangdong
virus isolate G3, Zhiwu Bingli Xuebao (Acta
Phytopathologica Sinica), 35(3): 208-213 (
何自福
,
虞皓
,
罗方芳
, 2005,
广东番茄曲叶病毒
G3
分离物基因组
DNA-A
的分子特征
,
植物病理学报
, 35(3): 208-213)
Ji Y.F., Schuster D.J., and Scott J.W., 2007,
Ty
-
3
, a
begomovirus resistance locus near the Tomato yellow leaf
curl virus resistance locus
Ty
-
1
on chromosome 6 of
tomato, Mol. Breeding, 20(3): 271-284
Ji Y.F., Scott J.W., Schuster D.J., and Maxwell D.P., 2009,
Molecular mapping of
Ty
-
4
, a new tomato yellow leaf curl
virus resistance locus on chromosome 3 of tomato, Journal
of the American Society for Horticultural Science, 134(2):
281-288