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何俊蓉等
, 2011, 13
个国兰品种遗传关系的
SRAP
分析
,
分子植物育种
Vol.9 No.86 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0086)
1620
2009;
杨向晖等
, 2009;
王长林等
, 2009;
俞旭平等
,
2009,
中草药
, 40: 243-245)
中得到应用。
国兰，兰科
(Orchidaceae)
兰属
(
Cymbidium
)
植
物，被列为中国十大名花之首。国兰花色素淡，清
雅不艳，享有
‘
天下第一香
’
的美誉，且具有独特的
内涵与意境，具有极高的观赏价值。兰科植物杂交
范围很宽，种间，甚至属间亦能杂交；且变异性很
大，中间类型多，种的界限不清楚，为兰花品种的
研究带来困难。本文应用
SRAP
技术比较国兰品种
间的遗传关系，试图进一步探明其品种鉴定及其分
类依据。
1
结果与分析
1.1
国兰
SRAP
引物扩增多态性分析
在
64
对引物组合中
(
表
1)
，有
57
对可以对国兰
14
样品扩增出较多特异性条带
(
图
1)
。
57
对引物共扩增
出
746
条带，其中有
738
个多态性位点，总的位点多
态性比率为
98.9%
，平均每对引物组合产生的位点
数为
13
个位点。
表
1
研究采用的引物序列及组合
Table 1 Study used a Primer sequences and combinations
正向引物
Forward primer
反向引物
Reverse primer
me1 TGAGTCCAAACCGGAAG
em1 GACTGCGTACGAATTGTC
me2 TGAGTCCAAACCGGATA
em2 GACTGCGTACGAATTCTG
me3 TGAGTCCAAACCGGTAA
em3 GACTGCGTACGAATTCCA
me4 TGAGTCCAAACCGGAAT
em4 GACTGCGTACGAATTCCG
me5 TGAGTCCAAACCGGAGG
em5 GACTGCGTACGAATTAAC
me6 TGAGTCCAAACCGGTGT
em6 GACTGCGTACGAATTGCC
me7 CTGGCGAACTCCGGATG
em7 GACTGCGTACGAATTCAG
me8 GGTGAACGCTCCGGAAG
em8 GACTGCGTACGAATTTGC
图
1
引物
me7/em7
对国兰
14
样品的
SRAP
扩增电泳图
Figure 1 The SRAP amplified band patterns of 14
Chinese
Cymbidium
samples by the primer pair me7/em7
注
: M: DL2000, maker; 1:
金边墨兰
; 2:
墨兰
(
不是素心
); 3:
皇冠蝶
; 4:
隆昌素
; 5:
叶艺隆昌素
; 6:
隆昌素根状茎
; 7:
宋
梅
; 8:
蕙兰
; 9:
建兰三星蝶
; 10:
龙泉荷
; 11:
余蝴蝶
; 12:
翠
盖荷
; 13:
张荷素
; 14: 17
号
Note: M: DL2000, maker; 1:
Cymbidium
sinense with golden
edge; 2:
Cymbidium
sinense; 3: Huangguandie; 4: Longchangsu;
5: Longchangsu with golden edge; 6: Rhizome with
Longchangsu; 7: Songmei (L); 8: Huilan; 9: Sanxingdie; 10:
Longquanhe; 11: Yuhudie; 12: Cuigai; 13: Zhanghesu; 14:
Number 17
1.2
国兰品种间相似性分析
采用
ntsyspc2.02
软件对国兰
14
样品的
SRAP
扩
增结果进行统计分析，得出其相似性系数矩阵表，
见表
2
。其中，国兰样品间的相似性系数分布在
0.625~0.831
之间。皇冠蝶与隆昌素试管苗之间的相
似性系数最大
(0.831)
，表明两者之间的遗传距离最
近；叶艺隆昌素与龙泉荷之间的相似性系数最小
(0.625)
，其亲缘关系最远。
1.3
国兰样品的
SRAP
聚类分析
利用
ntsyspc2.02
软件进行数据分析，选用
UPGMA
法生成聚类分析树状图
(
图
2)
。由图可知，
蕙兰、春兰、春剑、墨兰、建兰的遗传距离都相距
较远。金边墨兰与墨兰在
0.803
处聚类；春剑里除了
叶艺隆昌素外聚为一群；余蝴蝶、翠盖荷及张荷素
聚合，龙泉荷和宋梅则是单独一支。