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张永辉等
, 2011,
基于
ITS
cpDNA
序列的中国野生葡萄分子系统进化
,
分子植物育种
Vol.9 No.78 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0078)
1574
3
22
个葡萄属植物基因型的
30
ITS
序列克隆构建的最
大简约树
:
树长
=333,
一致性指数
=0.8481,
保留指数
=0.8691;
支上的数字是
1000
次自展的数据支持率
Figure 3 Maximum parsimonious tree for 22 genotypes of
vitis
materials obtained from 30 ITS sequence data
Note: The tree has a length of 333 steps, a consistency index(CI)
of 0.8481, retention index (RI) of 0.8691; Numbers above the
branches are bootstrap values (%) of 1000 replications
列,
ITS
测序得到的
3
个克隆有
2
个克隆相同,这
与小麦族中不同品种之间存在主要和次要两种核
糖体
DNA
的结果相同
(Dubcovsky and Dvorak,
1995)
,由于受到多重核糖体
DNA
序列影响,
ITS
序列所反映的亲本信息较为复杂,并且在系统进化
树的构建中存在塌陷
(collapse)
现象,试验所构建的
ITS
树只能够部分揭示
22
份材料之间的亲缘关系。
2.3
部分样本亲缘关系
分枝
F
中,毛葡萄、腺枝葡萄和桑叶葡萄
3
的亲缘关系在学者之间存有不同意见,有认为桑叶
葡萄是毛葡萄的亚种,也有认为桑叶葡萄应作为独
立的种处理
(
孔庆山
, 2004)
。桑叶葡萄与毛葡萄的形
态特征差异较大,而腺枝葡萄与毛葡萄的差异小,
仅按照腺毛的有无来确定分类地位。图
1
显示
3
种聚在一起,亲缘关系较近,图
2
中毛葡萄与腺枝
葡萄亲缘关系较桑叶葡萄近,上述结果与王文采观
点一致
(
王文采
, 1979)
,认为桑叶葡萄应作为一个独
立的种来对待。毛葡萄是我国葡萄属植物中较为原
始类型
(
晁无疾和袁志发
, 1990)
,分枝F表明毛葡
萄、腺枝葡萄和桑叶葡萄独立聚类且与其它葡萄属
植物的亲缘关系较远
(BS 100%)
,也说明上述
3
较早的从原始种中发生独立进化。
分枝
G
中,
燕山葡萄
0947’
是上世纪
80
年代
河北昌黎果树所提供的燕山葡萄实生种子生长的
单株,是两性花,扦插容易生根,与中国野生葡萄
为雌雄异株以及扦插难以生根的特点不符;中国野
生葡萄不具美洲种群抗葡萄根瘤蚜的特性,而前期
试验结果表明
燕山葡萄
0947’
对葡萄根瘤蚜具有一
定的抗性
(
张化阁等
, 2009)
,叶绿体树中
‘var.
dissecta.68’
和中国野生葡萄聚在一起,
ITS
树中
‘var.
dissecta.68.2’
‘V. riparia.79.3’
聚在一起后又和
‘V.
riparia.79.1’
聚在一起
(
自展支持值分别为
84%
99%)
,因此,推测
燕山葡萄
0947’
是母本为中国野
生葡萄的一个种,父本为河岸葡萄的种间杂种。
分枝
H
中,欧亚种葡萄
玫瑰香
的花粉形态研
究表明其与起源于我国的山葡萄有一定的亲缘关
(
刘 三 军 等
, 1997)
, 叶 绿 体 树 中 显 示
‘V.
amurensis.28’
‘V. vinifera.74’
亲缘关系较远,
ITS
树中
‘V. amurensis.28.3’
‘V. vinifera.74.2’
聚在一起
(BS 72%)
。结合母本和双亲信息可知玫瑰香与山葡
萄的母本亲缘关系较远,父本亲缘关系较近。
分枝
I
中,
灵宝变叶
01’
变叶葡萄
0958’
缘关系较近
(BS 72%)
,与其形态性状分类结果一致
(
牛立新和贺普超
, 1996)
分枝
J
中,
华东葡萄
1057’
葛藟
0943’
聚在
一起
(BS 96%)
,与形态性状分类结果一致
(
牛立新和
贺普超
, 1996)
湖南刺葡萄
沙地葡萄
0904’
亲缘
关系较近
(BS 99%)
,在前人的研究中未见报道。结
合母本和双亲信息推测,二者母本亲缘关系较远,
而父本亲缘关系较近。
由于
ITS
树在聚类过程中存在支持值较低
(<50%)
‘var. dissecta.68.3’
‘V. bellula.69.4’
‘V.
piasezkii.55.3’
等一些材料的聚类结果值得商榷,需
要结合形态学特征和其它分类手段进行研究。
3
材料和方法
3.1
材料
试验中的
22
份材料包括
18
份中国野生葡萄,
1
份欧亚种,
2
份美洲种和
1
份圆叶葡萄亚属,均