陈罡等
, 2011,
美国白蜡
SRAP-PCR
反应体系的建立与优化
,
分子植物育种
Vol.9 No.74 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0074)
1544
火
30 s
,
72
℃延伸
1 min
;随后的
35
个循环为:
94
℃
变性
30 s
,
50
℃复性
30 s
,
72
℃延伸
1 min
;最后
72
℃延伸
8 min
,
4
℃保存。扩增产物用
2%
琼脂糖
凝胶电泳进行分离,经
EB
染色后在
Gel-2000
凝胶
成像系统
(BIO-RAD)
上观察和记录。以上实验所用
试剂均购自北京
TIANGEN
生物有限公司。
3.5 SRAP-PCR
反应体系验证及不同种源美国白蜡
多态性检测
在优化后的反应体系基础上,选取
4
个不同种
源的美国白蜡材料进行体系验证,并对其进行
SRAP
多态性检测。
PCR
产物用
8%
非变性聚丙烯
酰胺凝胶电泳进行分离,银染法染色显影后,用数
码相机拍照并观察。
作者贡献
陈罡、叶景丰和马冬菁是本研究的实验设计和实验研
究的执行人;陈罡完成数据分析、论文初稿的写作;王骞春
和潘文利参与实验设计,试验结果分析;范俊岗是项目的构
思者及负责人,指导实验设计,数据分析,论文写作与修改。
全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由国家林业局
“948”
项目
(2007-4-15)“
抗寒耐盐
碱美国白蜡优良种源及盐碱土壤改良技术引进
”
课题资助。
作者感谢辽宁省农业生物技术重点实验室的师生在本实验
过程中提供的技术支持和有益的建议。感谢两位匿名的同行
评审人的评审建议和修改建议。本文中提到了我们实验中涉
及的有关仪器和试剂供应商,这并非我们为这些仪器和试剂
供应商的产品和服务提供推荐或背书。
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