Page 19 - 2011no60

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分子植物育种
(
网络版
), 2011
,
9
,
1446
-
1449
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2011, Vol.9, 1446
-
1449
http://mpb.
5th
.sophiapublisher.com
1446
研究报告
A Letter
SSR
标记简便快速鉴定玉米品种纯度
王帮太
1
,
秦贵文
1,2
,
郭华
1
,
张守林
1
,
常见智
1
,
张同香
1
,
刘海霞
1
1.
鹤壁市农业科学院
,
鹤壁
, 458031
2.
河南浚单种业科技有限公司
,
鹤壁
, 458031
通讯作者
:
qgw6666@126.com; bangtaiw@163.com
作者
分子植物育种
, 2011
,
9
,
60
doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0060
收稿日期:
2011
03
12
接受日期:
2011
04
28
发表日期:
2011
05
17
这是一篇采用
Creative Commons Attribution License
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,
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件的使用与传播。
引用格式:
王帮太等
, 2011, SSR
标记简便快速鉴定玉米品种纯度
,
分子植物育种
Vol.9 No.60 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0060)
为了提高
SSR
标记检测玉米纯度效率,节约检测成本。本研究通过最大限度优化分子标记检测体系中
DNA
提取、
PCR
扩增体系、电泳检测等环节。建立起以单籽粒微量胚乳碱煮法提取
DNA
2.5 µL PCR
扩增体系、多排上样电泳检测及
两步法银染显影为一体高效、快速、经济的
SSR
标记检测玉米种子纯度体系。应用所建立的检测体系对浚单系列品种纯度
进行检测,能够迅速、准确地得出结果。
关键词
玉米
;
种子纯度
; PCR
扩增
; SSR
标记
Simple and Rapid Identification of Maize Cultivars Purity by SSR Markers
Wang Bangtai
1
, Qin Guiwen
1,2
, Guo Hua
1
, Zhang Shoulin
1
, Chang Jianzhi
1
, Zhang Tongxiang
1
, Liu
Haixia
1
1. Hebi Academy of Agricultural Sciences, Hebi, 458031, P.R. China
2. Henan Xundan Seed Tech CO., LTD, Hebi, 458031, P.R. China
Corresponding author, qgw6666@126.com; bangtaiw@163.com;
Authors
Abstract
To improve the efficiency of the maize-purity detection by SSR marker, and save the testing costs. In this study,
molecular marker technology was maximizing optimized from DNA extraction, PCR amplification system, electrophoresis detection.
Established the efficient, rapid and economical maize-purity detection system by SSR markers on the base of alkaline-heating for
DNA extraction from a single grain endosperm, 2.5 uL PCR amplification system, and multi-row loading gel electrophoresis
combined with two-step silver staining. Applying the system to detect the purity of the Xundan cultivars, we can get a quick and
accurate outcome.
Keywords
Maize; Cultivars purity; PCR amplification; SSR
研究背景
玉米种子真伪和纯度检验是种子企业生产过
程中的重要环节,对稳定和推广优良品种起着重要
的作用。目前,蛋白质和同工酶电泳检测种子纯度
的技术在多数种子企业中应用广泛,但这种方法存
在着多态性有限、对亲缘关系较近及遗传基础复杂
的材料难以鉴别,鉴定结果准确度有待提高等缺点
(
王风格等
, 2003)
SSR
标记检测作为目前成熟的
DNA
指纹检测技术,具有可靠性强、多态性丰富、
标记数量多、重复性高、操作简单等优点,其逐渐
在种子纯度检测上得到了应用研究
(
王凤格等
, 2003;
刘龙洲等
, 2003;
李晓辉等
, 2003)
李晓辉等
(2003)
应用
SSR
标记技术结合单籽粒
DNA
快速提取方法,利用
21
份玉米骨干自交系及其
组配的
13
个杂交种为材料,研究了
SSR
标记在玉米
杂交种种子纯度的鉴定技术;刘龙洲等
(2003)
建立
了一套应用
SSR
分子标记技术鉴定
SC704
玉米亲本
及杂交种纯度的方法;王凤格等
(2003)
DNA
提取、
PCR
扩增、电泳检测等环节对
SSR
技术进行了优化,
最终建立了一套完善的适用于玉米品种鉴定的
SSR
标准体系;陈兆贵等
(2010)
利用
ISSR
技术对甜玉米
种子纯度鉴定技术进行了研究,为甜玉米的真伪鉴
定和品种的选育提供了技术依据;王帮太等
(2009a)
通过对分子标记检测各环节的进一步优化,建立了