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岳晋军等
, 2011,
毛竹种胚愈伤组织诱导及分化的初步研究
,
分子植物育种
Vol.9 No.57 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0057)
1427
长,愈伤组织生长速度慢且容易褐变,当浓度升
高到
4.0 mg/L
时愈伤组织具有较快的生长速度,
且质量较高浓度情况下好,
6.0 mg/L
时,愈伤组
织多数水渍状,透明,当升高到
10.0 mg/L
时,情
况更加严重。
从不同放置方式和激素浓度对愈伤组织诱导
的结果来看,胚根部位发生的愈伤组织质量很差,
可能盾片或者胚芽位置产生的愈伤组织质量较好,
根据王海波等
(
孙敬三等
, 2006)
方法采用切除胚根
的方式设计了纵切和剥胚作为对照。
1.2
不同切割方式对愈伤组织诱导的影响
(
2)
剥胚为三种处理方式中操作最复杂的一种,胚
容易受到刀片镊子的机械损伤,容易污染,没有胚
乳愈伤组织的营养供给,愈伤组织发生率低至
21.7%
,且多是疏松,缺少紧实性的胚性愈伤组织
出现,实际操作中不被接受。
纵切方式特点是在胚上人为地制造出伤口,容
易导致胚活力下降,愈伤组织诱导率也随着降低,
诱导出的愈伤组织多数呈白色透明状,抑或灰白
色,往往呈水渍化,质地松软,致密的淡黄色愈伤
组织较少。
横切损伤或者切除了部分胚根,造成了胚根生
活力下降,有效地控制疏松非胚性愈伤组织的产
生,产生较多的淡黄色致密愈伤组织,少量的白色
透明状愈伤。这种方法是估计胚根的大约位置,切
除的时候很大程度上依赖操作者经验,相对来说具
有一定的局限性。但就控制疏松非胚性愈伤组织产
生而言,不失为一种较好的技术措施。
1.3
愈伤组织的分化
挑选通过横切方式处理后接种到
D3
培养基上
诱导的愈伤组织,状态较为一致,接种到不同培养
基中
(
3)
。光照培养,
26
30 d
统计褐变及分化
情况。
据表
3
数据分析,随着培养基配方的改变,愈
2
不同切割方式对毛竹种胚愈伤组织诱导的影响
Table 2 Influence of different cutting on
P. heterocycla
var.
pubescens
embryos callus induction
切割方式
Cuting ways
培养基
Medium
无菌数
Aseptic number
愈伤发生率
(%)
Callus rate (%)
胚性愈伤率
(%)
Embryogenic callus rate(%)
生长状况
Growth condition
D1
43
74.4
14.0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D2
46
76.1
17.4
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D3
32
93.8
43.7
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D4
44
93.2
20.5
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
横切
Crosscut
D5
43
86.0
7.0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D1
43
44.2
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D2
31
45.2
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D3
45
51.1
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D4
46
67.4
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
纵切
Vertical cut
D5
45
88.9
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
剥胚
Stripping embryo
D3
23
21.7
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation