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岳晋军等
, 2011,
毛竹种胚愈伤组织诱导及分化的初步研究
,
分子植物育种
Vol.9 No.57 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0057)
1426
种胚
(
李楠等
, 2009)
，毛竹成熟种胚作为外植体不
受季节限制，可以周年使用，但有污染率较高的
问题
(
谢庆华等
, 2000)
，同时存在高质量愈伤组织
诱导困难和诱导率低下等问题。为了提高毛竹成
熟种胚的愈伤组织诱导率和质量，对毛竹种胚在
不同放置和切割方式下愈伤组织诱导的影响进行
了研究，以期推动毛竹的再生体系及其生物技术
遗传改良等研究。
1
结果与分析
1.1
不同放置方式对愈伤组织诱导的影响
按照盾片朝上和盾片朝下以及剥胚等三种不
同处理方式，将种胚接种到不同培养基上，培养
30 d
，
统计愈伤组织生长情况及发生率。
从表
1
中数据看出，盾片朝下放置，种胚的盾
片和胚芽接触培养基，最大限度地吸收培养基中的
营养和激素，因此比盾片朝上更容易诱导出愈伤组
织，且质量好。盾片朝上时，胚根容易接触培养基，
胚根先萌动形成愈伤组织，来源于胚根的愈伤组织
质量较差。
接种
7 d
后，愈伤组织开始出现，最初出现的是
白色柔软的非胚性愈伤组织，一般半透明状或水渍
化
(
图
1A)
，此后略黄色、有一定硬度的胚性愈伤组
织也会出现，两者往往一起生长，但非胚性愈伤组
织生长速度明显比胚性愈伤组织生长速度快。在较
低的
2,4
-
D
浓度下，种胚更容易出现胚根和胚芽生
图
1
毛竹种胚愈伤组织诱导情况
注
: A:
种胚诱导的疏松愈伤组织
; B:
种胚诱导的紧实愈
伤组织
; C:
紧实愈伤组织生长情况
; D:
疏松愈伤组织生
长情况
Figure 1 Callus states fromMoso bamboo embryo
Note: A: loose callus from embryo; B: compact callus from
embryo; C: growing of compact callus; D: growing of loose callus
表
1
放置方式对毛竹种胚愈伤组织诱导的影响
Table 1 Different placement ways on
P. heterocycla
var.
pubescens
embryo callus induction
放置方式
Placement
培养基
Medium
无菌数
Aseptic number
愈伤发生率
Callus rate
胚性愈伤率
Embryogenic callus rate
愈伤组织状况
Growth condition
D1
49
20.4
4.1
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D2
52
57.7
7.8
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D3
41
78.0
14.6
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D4
43
93.0
6.9
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
盾片朝上
Scutellum up
D5
44
88.6
0
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D1
41
36.6
7.3
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D2
44
84.1
13.6
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D3
52
57.8
21.1
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
D4
48
66.7
8.3
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation
盾片朝下
Scutellum down
D5
47
85.1
2.1
易褐变
,
无分化
Browning easily, no differentiation