Page 22 - 2011no52

郭修武等, 2011, 应用 SRAP 分子标记技术鉴定葡萄种间杂交后代, 分子植物育种 Vol.9 No.52 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0052)
1392
SRAP 引物组合的筛选 选取 8 条正向引物和
10 条反向引物共组合 80 对 SRAP 引物组合，其序
列见表 1 。对父母本材料进行多态性 SRAP 引物组
合筛选，从中选出扩增条带较清晰、带型较丰富且
出现父本特异性条带的引物组合，用于后代的真实
性鉴定。
表 1 SRAP 引物序列
Table 1 Primer sequences used for SRAPA anylysis
编号
Code
正向引物
Forward primers
编号
Code
反向引物
Reverse primers
Me1
Me2
Me3
Me4
Me5
Me6
Me7
Me8
5′- TGAGTCCAAACCGGATA- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGAGC-3′
5′- TGAGTCCAAACCGGAAT- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGACC- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGAAG- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGTAG- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGTTG- 3′
5′- TGAGTCCAAACCGGTGT- 3′
Em1
Em2
Em3
Em4
Em5
Em6
Em7
Em8
Em9
Em10
5′-GACTGCGTACGAATTAAT -3′
5′-GACTGCGTACGAATTTGC- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTGAC- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTTGA -3′
5′-GACTGCGTACGAATTAAC- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTGCA- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTATG-3′
5′-GACTGCGTACGAATTAGC- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTACG- 3′
5′-GACTGCGTACGAATTTAG -3′
作者贡献
郭修武和郭印山是本研究的试验设计人；张鹏翔和刘镇东
是试验研究的执行人；张鹏翔，刘镇东，李坤完成数据分析，
张鹏翔，刘镇东完成论文初稿的写作；李成祥参与试验设计，
郭修武是项目的构思者及负责人，郭印山指导试验设计，数据
分析及论文修改。全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由国家自然科学基金项目(31000894)、国家现代
农业产业技术体系建设专项基金项目(nycytx-30-ZP-08)、辽
宁省科技厅重大科技攻关项目(200820403) 、辽宁省教育厅
科研项目(L2010492) 和沈阳农业大学青年教师基金项目
(20092005)共同资助。感谢沈阳农业大学郭修武教授与郭印
山副研究员在本试验过程中的技术支持和有益建议以及刘
镇东博士的大力协助。感谢课题组全体老师和同学的帮助。
参考文献
Guo D.L., Zhang J.Y., Li M., Zhang G.H., and Liu C.H., 2010,
Optimization of SRAP-PCR system in grape and primers
screening, Jiyinzuxue yu Yingyongxue (Genomics and
Applied Biology), 29(2): 379-384 (郭大龙, 张君玉, 李
猛, 张国海, 刘崇怀, 2010, 葡萄 SRAP 反应体系优化及
引物筛选, 基因组学与应用学, 29(2): 379-384)
Hanania U., Velcheva M., Sahar N., Perl A., 2004, An
improved method for isolating high-quality DNA from
vitis vinifera nuclei, Plant Molecular Biology Reporter.,
22(2): 173-177
He P.C., eds., 1999, Grape science, China agriculture press,
Beijing, China, pp.324-348 (贺普超, 编著, 1999, 葡萄学,
中国农业出版社, 中国, 北京, pp.324-348)
Kong Q.S., eds., 2004, Chinese Grape Biography, China
Agriculture Science and Technology Press, Beijing, China,
pp.127-136( 孔庆山,编著, 2004, 中国葡萄志, 中国农业
科学技术出版社, 中国, 北京, pp.127-136)
Li G., Quiros C.F., 2001, Sequence-related amplified
polymorphism (SRAP), a new marker system based on a
simple PCR reaction: its application to mapping and gene
tagging in brassica, Theor. Appl. Genet.., 103: 455-461
Liu L.W., Hou X.L., Gong Y.Q., Zhang Y.M., Wang K.R., and
Zheng J.F., 2004, Application of molecular marker in
variety identification and purity testing in vegetable crops,
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding) 2(4):
563-568 ( 柳李旺, 侯喜林, 龚义勤 , 张玉明 , 王开荣,
郑军飞, 2004, 分子标记技术在蔬菜作物品种与纯度检
测中的应用, 分子植物育种, 2(4): 563-568)
Lu J.Y., Mao Y.M., Shen L.Y., Peng S.Q., and Liu M., 2005,
Application of AFLP markers for identification of hybrids
from open pollinated dongzao (Zizyphus jujuba Mill.)
Progenies, Yuanyi Xuebao (Acta Horticulturae Sinica),
32(4): 680-683 ( 鹿金颖 , 毛永民, 申莲英 , 彭世琪 , 刘
敏, 2005, 用 AFLP 分子标记鉴定冬枣自然授粉实生后
代杂种的研究, 园艺学报, 32(4): 680-683)
Ma H.X., Chen P.D., Yu G.H., and Ren L.J., 2007, Cytogenetics
and RAPD analysis of interspecific hybrids from the cross
of fragaria mandschurica staudt and F. ananassa duch,