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张作青等
, 2011,
转
il-4
基因大白菜
(
Brassica Pekinensis
Rupr.)
分子检测及遗传和表达研究
,
分子植物育种
Vol.9 No.42 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0042)
1321
表
2
不同转化处理对阳性率的影响
Table 2 Different treatment combination effects on positive rate
品种
Variety
转化处理组合
Treatment
combination
il-4
阳性株数
Numbers of positive
plants with il-4
阴性株数
Numbers of negative
plants
总数
Numbers of total
阳性率
(%)
Positive rate of
Plants (%)
H2
AH
16
171
187
8.56
H2
BH
2
146
148
1.35
总数
Numbers of total
18
317
335
χ
2
=8.627
注
: χ
2
1, 0.05
=3.841; χ
2
1, 0.01
=6.635
Note: χ
2
1, 0.05
=3.841; χ
2
1, 0.01
=6.63
1.7
不同品种对
il-4
转化率的影响
将哈白二号与潍白六号在相同转化处理时期
的
il-4
阳性率统计并进行
χ
2
独立性检验
(
表
3)
。结果表
明，在
AH
转化处理下，哈白二号与潍白六号的阳
性率差异不显著，其中哈白二号的阳性率较高，为
8.56%
。
表
3
不同品种对阳性率的影响
Table 3 Different varieties effects on positive rate
品种
Variety
转化处理组合
Treatment
combination
il-4
阳性株数
Numbers of positive
plants with il-4
阴性株数
Numbers of
negative plants
总数
Numbers of total
阳性率
(%)
Positive rate of
plants (%)
H2
AH
16
171
187
8.56
W6
AH
26
395
421
6.18
总数
Numbers of total
42
566
608
χ
2
=1.138
注
: χ
2
1, 0.05
=3.841; χ
2
1, 0.01
=6.635
Note: χ
2
1, 0.05
=3.841; χ
2
1, 0.01
=6.635
2
讨论
2.1
关于
il-4
基因在大白菜后代传递规律的讨论
在本试验中，
T
6
代大白菜的
il-4
基因分离情况
严重偏离
3:1
的孟德尔遗传定律，很可能是转基因
的失活、纯合体致死效应及一些未知的原因，导致
在自交高世代中也往往得不到纯合体或者无法得
到纯合体
(Budar, 1986)
。其次，外源基因在自交传
递过程中的丢失与外源基因不能通过花粉有效传
递也可能造成非孟德尔遗传现象，丢失的原因可能
是转育过程中，由于基因互作，导致基因片断丢失，
也可能是
il-4
基因在转化时未整合到大白菜的基因
组中，在生殖细胞形成过程中，
il-4
基因可能没有
正常分配给雌雄配子，造成基因丢失
(
华志华等
,
2003; Huaijun, 2005)
。
近年来，转基因工程发展迅速，许多植物的遗
传转化相继获得成功。但也有研究表明，在高等植
物中，
30%
的转基因实验都发现了基因沉默现象。
引起基因沉默的原因很多，转基因的拷贝数和构
型、在植物上的整合位点、转录水平等都与沉默有
关，外界环境如温度过高、光照过强也会增加基因
沉默发生的几率和产生时间
(
吴迪
, 2002)
。除此以
外，一些人为因素也可能导致实际观察到的比例值
偏低，如
PPT
抗性筛选时，对植株叶面直接喷洒筛
选剂的方法简单且易于操作，但是可能造成敏感植
株的死亡，很难准确揭示遗传规律的真实性。
2.2
il-4
基因在大白菜后代中表达讨论
外源基因能否在受体植株内表达并最终合成
目的蛋白是转基因技术的直接目标。检测整合的基