董玉梅等
, 2011,
全雄芦笋泽西骑士
(Jersey Knight)
的离体快繁
,
分子植物育种
(online) Vol.9 No.103 pp.1741-1748 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0103)
1746
表
4
不同激素组合对泽西骑士试管苗生根的影响
Table 4 The effect of different phytohormone concentration on regeneration rate of ‘Jersey Knight’
处理
Treatment
MS
激素组合
(mg/L)
Concentration of Phytohormone (mg/L)
接种数
(
个
)
No. of culture
所用不定芽的长度
(cm)
及相应的生根率
(%)
The length of the shoots (cm) and their percentage of
rooting (%)
0.5~2 cm
3 cm
4 cm
5 cm
1
1/2MS NAA 0.1+6
-
BA 0+IBA 0.5+KT 0.05
30
30
26.7
10
3.3
2
1/2MS NAA 0.5+6
-
BA 0+IBA 0.5+KT 0.05
30
16.7
10
0
0
3
1/2MS NAA 0.5+6
-
BA 0+IBA 0 +KT 0.05
32
12.5
18.8
9.3
3.1
4
1/2MS NAA 0.5+6
-
BA 0.1+IBA0+KT 0.1
30
10
3.3
0
0
5
1/2MS NAA 0.5+6
-
BA 0.5+IBA 0+KT 0.1
30
6.7
0
0
0
6
1/2MS NAA 0.5+6
-
BA 0+IBA 0+KT 0
30
13.3
16.7
0
0
7
MS
NAA 0+6
-
BA 0+IBA 0+KT 0
32
18.8
18.8
3.1
0
8
MS
NAA 0.5+6
-
BA 0.1+IBA 0+KT 0
30
20
16.7
6.7
0
9
MS
NAA 0.5+6
-
BA 0.25+IBA 0+KT 0.1
30
43.3
36.7
10
6.7
10
MS
NAA 0.1+6
-
BA 0.25+IBA 0+KT 0.1
32
75
56.3
12.5
6.3
表
5
不同的移栽基质对试管苗移栽成活率的影响
Table 5 The effect of different media on survival ratio of ‘Jersey Knight’
基质配比
(
腐殖土
:
垤石
:
沙
)
移栽数
(
株
)
成苗数
(
株
)
成活率
(%)
Proportion of the matrix (umus: stone: sands) No. of transplanting plants No. of living plants percentage of the alive plants (%)
5:5:0
20
11
55
5:3:0
20
15
75
5:3:1
20
9
45
1:0:0
25
6
24
2
讨论
本研究中,全雄芦笋利用不同外植体培养成苗
时的两条途径
(
王蒂等
, 2003)
:①是直接经器官发生
途径诱导侧芽增殖成多个不定芽,生根成试管苗;
②是诱导愈伤组织发生,再经愈伤组织再分化产生
不定芽,生根成试管苗。试验结果显示,该两条途
径都能离体快繁优质泽西骑士
(Jersey Knight)
芦笋
种苗。该离体快繁体系的建立,可能为其它品种的
芦笋离体快繁提供理论依据。在本研究中,①在培
养基
MS+NAA 1.0 mg/L+6
-
BA 1.0 mg/L+2,4
-
D
2.0 mg/L
中泽西骑士品种髓部诱愈率达
100%
,茎
段诱愈率为
90.6%
,此结果预示,芦笋中具有重要
生物活性的次生代谢产物,可利用愈伤组织培养等
细胞工程手段来规模化生产;②利用茎段抑制顶端
优势、促进侧芽增殖的有效培养基是:
MS+NAA
(0.5~1.0) mg/L+6
-
BA (0.25~0.5) mg/L
,每个带芽茎
段平均每个芽体可得到
2~3
个丛生芽,此点提示,
诱导泽西骑士芦笋品种的侧芽增殖时,与常规
(
王蒂
等
, 2003)
激素模式不同的是,当生长素
NAA
的浓
度是细胞分裂素
6
-
BA
的两倍左右时,侧芽的增殖
系数明显提高,而细胞分裂素浓度不高于生长素浓
度时有利于侧芽增殖。这一现象是否在其他的芦笋
品种的组培中有共同规律,需进一步重复不同基因
型芦笋的离体快繁来定论。
一个高效的芦笋快繁体系的建立不仅能为企业
或农户提供生产用种,同时还能为芦笋的分子生物
学和次生代谢网络等方面的研究奠定基础
(Sanjay
and Bopana, 2009)
。在以芦笋各部分为外植体进行
快繁时,成功与否的关键技术是生根。本研究用较
短的不定芽
(
小于
2 cm)
来获得较高的生根率。预示
较长的茎段可能合成生根抑制物,抑制了根的再
生。叶茎松等
(
私人通讯
, 2011)
用赤霉素
(GA)
合成与
作用抑制剂,嘧啶醇
(ancymidol)
,促进芦笋生根,
预示较长的芦笋茎段合成的生根抑制剂可能是
GA
类激素。另外从芦笋无菌培养物到完整试管苗获得
的过程中,
2,4
-
D
和
KT
两种生长调节剂起关键作
用,其中
2,4
-
D
对芦笋的愈伤诱导起到决定性作用;
而
KT
有利于芦笋不定芽的诱导及试管苗的生根,
这与前人的研究结果一致
(
孔萌萌和周根余
, 2006)
。
为避免不正常生根
(
图
4
C
)
,尽量取较短的不定芽来
诱导,并抑制
GA
的功能可能是解决问题的关键途
径,这可能与雄株芦笋为保持雄性性状而产生过多