林茂等
            
            
              , 2011,
            
            
              甘蓝型油菜隐性核不育系及其
            
            
              DH
            
            
              系的纯度的
            
            
              SSR
            
            
              检测
            
            
              ,
            
            
              分子植物育种
            
            
              Vol.9 No.6 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0006)
            
            
              1050
            
            
              表
            
            
              2
            
            
              材料编号
            
            
              Table 2 Serial number of the materials
            
            
              DH
            
            
              植株
            
            
              DH plant
            
            
              电泳所在泳道
            
            
              Serial number
            
            
              of electrophor-
            
            
              esis
            
            
              DH
            
            
              植株来源的
            
            
              姊妹交组合
            
            
              DH plant from
            
            
              whose first-cousin
            
            
              cross offspring
            
            
              电泳所在泳道
            
            
              Serial number
            
            
              of electrophor-
            
            
              esis
            
            
              DZ01
            
            
              1
            
            
              DZ25
            
            
              2
            
            
              DZ02
            
            
              3
            
            
              DZ26
            
            
              4
            
            
              DZ03
            
            
              5
            
            
              DZ27
            
            
              6
            
            
              DZ04
            
            
              7
            
            
              DZ28
            
            
              8
            
            
              DZ05
            
            
              9
            
            
              DZ29
            
            
              10
            
            
              DZ06
            
            
              11
            
            
              DZ30
            
            
              12
            
            
              DZ07
            
            
              13
            
            
              DZ31
            
            
              14
            
            
              DZ08
            
            
              15
            
            
              DZ32
            
            
              16
            
            
              DZ09
            
            
              17
            
            
              DZ33
            
            
              18
            
            
              DZ10
            
            
              19
            
            
              DZ34
            
            
              20
            
            
              DZ11
            
            
              21
            
            
              DZ35
            
            
              22
            
            
              DZ12
            
            
              23
            
            
              DZ36
            
            
              24
            
            
              DZ13
            
            
              25
            
            
              DZ37
            
            
              26
            
            
              DZ14
            
            
              27
            
            
              DZ38
            
            
              28
            
            
              DZ15
            
            
              29
            
            
              DZ39
            
            
              30
            
            
              DZ16
            
            
              31
            
            
              DZ40
            
            
              32
            
            
              DZ17
            
            
              33
            
            
              DZ41
            
            
              34
            
            
              DZ18
            
            
              35
            
            
              DZ42
            
            
              36
            
            
              DZ19
            
            
              37
            
            
              DZ43
            
            
              38
            
            
              DZ20
            
            
              39
            
            
              DZ44
            
            
              40
            
            
              DZ21
            
            
              41
            
            
              DZ45
            
            
              42
            
            
              DZ22
            
            
              43
            
            
              DZ46
            
            
              44
            
            
              DZ23
            
            
              45
            
            
              DZ47
            
            
              46
            
            
              DZ24
            
            
              47
            
            
              DZ48
            
            
              48
            
            
              加水定容
            
            
              1 000 mL
            
            
              ;
            
            
              50
            
            
              ×
            
            
              TAE buffer 1 000 mL
            
            
              :冰
            
            
              醋酸
            
            
              57.1 mL
            
            
              ,
            
            
              Tris
            
            
              碱
            
            
              242.0 g
            
            
              ,
            
            
              0.5 M pH8.0
            
            
              的
            
            
              EDTA
            
            
              200 mL
            
            
              ,加水定容
            
            
              1 000 mL
            
            
              ;
            
            
              6
            
            
              ×电泳上样
            
            
              buffer
            
            
              100 mL
            
            
              :溴酚蓝
            
            
              0.25 g
            
            
              ,二甲苯氰
            
            
              0.25 g
            
            
              ,蔗糖
            
            
              40.0 g
            
            
              ,
            
            
              加水定容
            
            
              100 mL
            
            
              。电泳及银染方法:电泳用
            
            
              10%
            
            
              的聚
            
            
              丙烯酰胺凝胶,缓冲液为
            
            
              0.5
            
            
              ×
            
            
              TBE
            
            
              ,加上样
            
            
              buffer
            
            
              1.5 μL
            
            
              ,上样量
            
            
              1.2 μL
            
            
              ,电流
            
            
              350A
            
            
              ,电压
            
            
              350 V
            
            
              电泳
            
            
              35 min
            
            
              ;银染时在固定液中固定
            
            
              12 min
            
            
              ,然后染色
            
            
              12 min
            
            
              ,用双蒸水漂洗
            
            
              30s
            
            
              ,最后显色,直至谱带清晰。
            
            
              作者贡献
            
            
              林茂、杨斌、肖华贵是本研究的实验设计和实验研究
            
            
              的执行人;林茂完成数据分析,论文初稿的写作;杨斌和肖
            
            
              华贵参与实验设计,田间实验工作及试验结果分析;饶勇是
            
            
              项目的指导和管理负责人;李超是项目的构思者及实验设计
            
            
              负责人,指导实验设计,数据分析,论文写作与修改。全体
            
            
              作者都阅读并同意最终的文本
            
            
              。
            
            
              致谢
            
            
              本研究由国家
            
            
              863
            
            
              计划
            
            
              (2009AA101105)
            
            
              、贵州省科学技
            
            
              术基金项目:黔科合
            
            
              J
            
            
              字
            
            
              [2007]2081
            
            
              号、贵州省农业科学院人
            
            
              才项目:黔农科合
            
            
              (
            
            
              人才
            
            
              ) 08004
            
            
              号资助。感谢贵州省油料研
            
            
              究所和西南大学农学与生物科技学院为本实验提供了便利
            
            
              的实验设备和场所、感谢重庆市油菜工程技术研究中心提供
            
            
              SSR
            
            
              引物,同时,感谢李加纳教授在本实验过程中提供的技
            
            
              术支持和有益的建议,为实验的顺利完成给以了极大的帮助。
            
            
              参考文献
            
            
              Chen F.X., Hu B.C., Li Q.S., and Zhang M.L., 1993, Discovery
            
            
              and study of genic male sterility (GMS) material 9012A in
            
            
              Brassica napus
            
            
              L.,
            
            
              Acta
            
            
              (
            
            
              Agriculturae Universitatis
            
            
              Pekinensis
            
            
              ), 19: 57-61 (
            
            
              陈凤祥
            
            
              ,
            
            
              胡宝成
            
            
              ,
            
            
              李强生
            
            
              ,
            
            
              张曼
            
            
              琳
            
            
              , 1993,
            
            
              甘蓝型油菜细胞核雄性不育材料
            
            
              9012A
            
            
              的发
            
            
              现与初步研究
            
            
              ,
            
            
              北京农业大学学报
            
            
              , 19: 57-61)
            
            
              Chen F.X., Hu B.C., Li C., Li Q.S., Chen W.S., and Zhang M.L.,
            
            
              1998, Genetic studies on GMS in
            
            
              Brassica napus
            
            
              L.:
            
            
              Ⅰ
            
            
              .
            
            
              Inheritance of recessive GMS line 9012A,
            
            
              Acta
            
            
              (
            
            
              Agronomica Sinica
            
            
              ), 24(4): 431-438 (
            
            
              陈凤祥
            
            
              ,
            
            
              胡宝成
            
            
              ,
            
            
              李成
            
            
              ,
            
            
              李强生
            
            
              ,
            
            
              陈维生
            
            
              ,
            
            
              张曼琳
            
            
              . 1998,
            
            
              甘蓝型油菜细胞
            
            
              核雄性不育性的遗传研究
            
            
              :
            
            
              Ⅰ
            
            
              .
            
            
              隐性核不育系
            
            
              9012A
            
            
              的遗
            
            
              传
            
            
              .
            
            
              作物学报
            
            
              , 24(4): 431-438)
            
            
              Fu F.Y., Chai Y.R., Liu L.Z., Chen L., Yang T., Jin M.Y., Ma
            
            
              A.F., Yan X.Y., Zhang Z.S., and Li J.N., 2007,
            
            
              Localization of QTLs for seed color using recombinant
            
            
              inbred lines of Brassica napus in different environments.
            
            
              Genome
            
            
              , 50(9):840-54
            
            
              Li C., Lin M., Xiao H.G., Yang B., RaoY., and Li J.N. 2008,
            
            
              Improvement of culture techniques in DH-line of
            
            
              Brassica
            
            
              napus
            
            
              L. (
            
            
              Journal of Anhui agriculture science
            
            
              ), 36(32):
            
            
              13972-13974, 14059 (
            
            
              李超
            
            
              ,
            
            
              林茂
            
            
              ,
            
            
              肖华贵
            
            
              ,
            
            
              杨斌
            
            
              ,
            
            
              饶勇
            
            
              ,
            
            
              2008,
            
            
              甘蓝型油菜
            
            
              DH
            
            
              系培养技术优化
            
            
              ,
            
            
              安徽农业科学
            
            
              ,
            
            
              36(32): 13972-13974, 14059)
            
            
              Sun C.C., Zhao H., Wang W.R., Li Y.L., Qian X.F., and Fang
            
            
              G.H., 2002, Inheritance and utilization of recessive genic
            
            
              male sterile line 20118A in
            
            
              Brassica napus
            
            
              L. (
            
            
              Chinese
            
            
              Journal of Oil Crop Sciences
            
            
              ), 24(4): 1-4 (
            
            
              孙超才
            
            
              ,
            
            
              赵华
            
            
              ,
            
            
              王伟荣
            
            
              ,
            
            
              李延莉
            
            
              ,
            
            
              钱小芳
            
            
              ,
            
            
              方光华
            
            
              , 2002,
            
            
              甘蓝型油菜隐
            
            
              性核不育系
            
            
              20118A
            
            
              的遗传与利用探讨
            
            
              ,
            
            
              中国油料作物
            
            
              学报
            
            
              , 24(4): 1-4)