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分子植物育种
(
网络版
), 2010
年
,
第
8
卷
,
第
15
篇
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2010, Vol.8, No.15
http://mpb.
5th
.sophiapublisher.com
第
1
页，共
6
页
研究报告
A Letter
三种抗生素对落叶松胚性细胞系生长的影响
朱彩虹
,
栗婷
,
韩素英
,
齐力旺
中国林科院林业研究所细胞生物学实验室
,
北京
, 100091
通讯作者
:
lwqi@caf.ac.cn;
作者
分子植物育种
, 2010
年
,
第
8
卷
,
第
15
篇
DOI: 10.5376/mpb.cn.2010.08.0015
收稿日期：
2010
年
10
月
30
日
接受日期：
2010
年
11
月
30
日
发表日期：
2010
年
12
月
27
日
这是一篇采用《
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朱彩虹等
, 2010,
三种抗生素对落叶松胚性细胞系生长的影响
,
分子植物育种
Vol.8 No.15 (DOI: 10.5376/mpb.cn.2010.08.0015)
摘要
以落叶松胚性细胞系
638(
日本落叶松
)
、
109(
长白落叶松
)
、
113(
日本落叶松
)
为供试材料，将各细胞系胚性组织接种至
添加有
0
-
35mg/L
的卡那霉素
(Km)
、
300
-
500mg/L
头孢霉素
(Cef)
或
300
-
500mg/L
羧苄青霉素
(Cb)
的继代培养基上培养，观察
胚性组织生长状态以及增殖情况，研究
3
种抗生素对各胚性细胞系生长的影响。结果表明：在添加抗生素的继代培养基上培
养
30d
后，胚性组织生长情况基本稳定。在相同浓度的
Km
作用下，落叶松胚性细胞系与其他植物的胚性细胞系反应相比更
加敏感。
3
种胚性细胞系对
Km
的敏感性不同：细胞系
113
对
Km
作用反应最敏感，
109
次之，
638
相对来说不太敏感，耐
受临界浓度值分别为
15 mg/L
、
20 mg/L
和
25 mg/L
。
Cef
和
Cb
在
300
-
500mg/L
的浓度范围内，对细胞系
109
的生长作用不
同：
Cef
具有促进作用，而
Cb
则具有毒害作用，因此落叶松遗传转化中，
Cef
适合用于抑菌处理。本文的研究结果明确了
供试的
3
种抗生素对落叶松胚性细胞系生长作用的概况，为落叶松遗传转化中抗生素的使用提供了依据。
关键词
胚性组织
;
卡那霉素
;
羧苄青霉素
;
头孢霉素
;
遗传转化
Effects of 3 Antibiotics on Growth of Embryogenic Tissues of Larch
Zhu Caihong , Li Ting , Han Suying , Qi Liwang
Laboratory of Cell Biology, Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Beijing, 100091
Corresponding author, lwqi@caf.ac.cn;
Authors
Abstract
To identify the optimal antibiotics and the concentration used in the transformation of larch based on somatic
embryogenesis, we studied the effects of Kanamycin (Km) at various concentrations on embryogenic tissues of larch cell lines 638,
109 and 113, and effects of Cefotaxime (Cef) and Carbenicillin (Cb) on cell line 109 as well in this paper. The embryogenic tissues of
the three larch cell lines were subcultured on proliferation media supplemented with Km (0
-
35mg/L) , Cef (300
-
500mg/L) or Cb
(300
-
500mg/L). According to the appearance of embryogenic tissues growth after subcultured for 30d, we found that: The
embryogenic tissues of larch were more sensitive to km than that of other species. And the sensitivities of 3 cell lines to Km were
different. Cell line 113 appeared to be most easily inhabited at a lower concentration of Km than the others. The critical selection
concentrations for cell lines 638, 109 and 113 were 25 mg/L
、
20 mg/L
、
15mg/L respectively. At the concentration of 300
-
500mg/L,
Cef showed a positive impact on the growth and proliferation of cell line 109 while Cb showed a negative impact. So it is suggested
that Cef be used to eliminate bacteria during transformation of larch using emryogenic tissues of cell line 109.
Keywords
Embryogenic tissue, Kanamycin, Cefotaxime, Carbenicillin, Genetic transformation
研究背景
落叶松
(Larix
ssp.)
为松科
(Pinaceae)
落叶松亚科
(Laricoideae)
落叶松属
(
Larix
Mill)
针叶用材造林树种，
可以作为多种工业用材，分布广泛，并以早期速生
而著称，是北半球温带与寒温带地区重要的经济和
生态树种。目前落叶松以传统育种为主，但由于其
生长周期长，具有高度杂合性，遗传操作难度大，
育种周期长，传统育种技术远远不能满足生产的需
求。建立高效稳定的落叶松遗传转化体系，对其品
质改良，加速遗传育种进程具有十分重要的意义，
也是研究外源基因在落叶松体内表达调控及功能
的重要前提。
利用抗生素筛选转化体和抑制细菌生长是遗传
转化工作中的重要内容。在筛选阶段，选择压偏大
不利于转化体的生长，从而导致转化率偏低甚至转