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医学遗传学与疾病研究
(
网络版
), 2012
年
,
第
1
卷
,
第
3
篇
,
第
15
-
18
页
Yixue Yichuanxue Yu Jibing Yanjiu (Online), 2012, Vol.1, No.3, 15
-
18
http://mgdr.5th.sophiapublisher.com
15
研究报告
Research Report
人乳汁中
microRNA
的稳定性
周琦
1
,
王晓艳
2
,
李青芝
2
,
王滔
2
,
蒋岸岸
2
1
雅安职业技术学院护理系
,
雅安
, 625000;
2
四川农业大学动物科技学院
,
雅安
, 625014
通讯作者
: zhouqiyaan@163.com;
作者
医学遗传学与疾病研究
, 2012
年
,
第
1
卷
,
第
3
篇
doi: 10.5376/mgdr.cn.2012.01.0003
收稿日期：
2012
年
08
月
03
日
接受日期：
2012
年
09
月
12
日
发表日期：
2012
年
09
月
14
日
本文首次发表在《基因组学与医学生物学》
(2012
年第
31
卷第
4
期
366-368
页
)
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引用格式
(
中文
)
：
周琦等
, 2012,
人乳汁中
microRNA
的稳定性
,
医学遗传学与疾病研究
(online) Vol.1 No.3 pp.15-18 (doi: 10.5376/mgdr.cn.2012.1.0003)
引用格式
(
英文
)
：
Zhou et al., 2012, Studies on the Stability of miRNAs in Human Breast Milk, Yixue Yichuanxue Yu Jibing Yanjiu (online) Vol.1 No.3 pp.15-18 (doi:
10.5376/mgdr.cn.2012.2.0003)
摘
要
为了研究人乳汁中的
microRNAs (miRNAs)
在体外储存状态下的稳定性。本研究采用模拟体外乳汁储存条件，对乳
汁进行室温孵育
24 h
，反复冻融
6
次，
100
℃
孵育
10 min
，以及模拟体内消化环境
(RNA
酶
A/T1 37
℃
孵育
1 h)
的处理条件，
通过实时荧光定量
PCR (qRT-PCR)
方法检测处理前后乳汁中
9
个内源性免疫相关和
1
个外源性人工合成
miRNA
的相对表达
量变化差异。研究结果显示：处理前后乳汁中内源性
miRNAs
和外源性
miRNA
均显著性降解
(P<0.01)
。内源性
miRNAs
降
解为初始量的
25%~70%
之间，而外源性
miRNA
则急剧降解至初始量的
0.06%~0.96%
。我们的实验表明人乳汁中内源性的
miRNAs
较外源性
miRNAs
在体外不同环境下具有更强的稳定性。
关键词
人乳汁
, microRNA,
稳定性
Studies on the Stability of miRNAs in Human Breast Milk
Zhou Qi
1
, Wang Xiaoyan
2
, Li Qingzhi
2
, Wang Tao
2
, Jiang An’an
2
1 Department of Nursing, Ya’an Vocational College, Ya’an, 625000;
2 College of Animal Science and Technology, Sichuan Agricultural University, Ya'an, 625014
Corresponding author: zhouqiyaan@163.com;
Authors
Abstract
In order to investigate the stability of microRNAs (miRNAs) in human breast milk, which is an important prerequisite for
the hypothesis that the exosomal miRNAs are transferable genetic material from mother to infant. The raw breast milk was subjected
to four types of treatment: (1) incubated at 26 for 0.5 to 24 hours; (2) subjected to six freeze
℃
-thaw cycles at -20 ; (3) treated with
℃
RNase A and RNase T1 for 60 min at 37 ; and (4) incubated at 100 for 10 min. We found that the exogenous synthetic miRNAs
℃
℃
were rapidly degraded, whereas endogenous miRNAs in human breast milk remained relatively stable when milk was subjected to
various harsh conditions. These results indicated that the endogenous miRNAs should have resistance to the harsh conditions to a
certain extent.
Keywords
Human breast milk, microRNA, Stability
人乳汁是婴儿最重要的食物来源，对婴儿的健
康发育特别是后天免疫的形成有着至关重要的作
用。
MicroRNAs (miRNAs)
是一种内源性的非编码
RNA
，由
22
个左右的核苷酸组成，通过在转录后
水平抑制靶
mRNA
的翻译而广泛参与生理和病理
反应过程的调节
(Bartel, 2009)
。
Kosaka
等
(2010)
在
人乳中发现了大量
miRNAs
的存在。由于乳汁的成
分复杂，在不同的存放环境中，人乳汁中的
miRNA
的完整性和稳定性都会受到一定的影响。
为了探究乳汁中
miRNAs
的稳定性，本研究对
人乳汁作设计了
4
种处理：室温孵育、反复冻融、
煮沸和
RNA
酶处理，利用荧光定量
PCR (qRT-PCR)
技术检测
miRNAs
的相对表达量变化，试图了解乳
汁中内源性的
miRNAs
及外源性
miRNAs
在不同处
理条件下的稳定性。