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癌症与分子诊断研究
(
网络版
), 2012
年
,
第
1
卷
,
第
7
-
11
页
Aizheng Yu Fenzi Zhenduan Yanjiu (Online), 2012, Vol.1, 7
-
11
http://cmdr.5th.sophiapublisher.com
11
(10 μmol/L) 0.4 μL
，
Reverse Primer (10 μmol/L) 0.4 μL
，
ddH
2
O 6.8 μL
。样本
CDNA
依次稀释
10
倍作为标
准品，共
6
个梯度制作标准曲线。反应条件为：
95
℃预变性
30 s
，
95
℃变性
5 s
，
60
℃退火
31 s
，
热循环
40 cycles
，最后
95
℃
15 s
，
60
℃
1 min
，
95
℃
15 s
。用
2
-
△△
Ct
法，计算基因的相对表达量。每
个样本做
4
个重复，求平均值。待检测基因的引物序
列如表
1
。
表
1
实时定量
PCR
的引物
Table 1 Primers of QRT-PCR
基因
Gene
引物
(5’-3’)
Primer (5’-3’)
APOBEC3G
APOBEC3F
CCL5
MX2
MX1
GAPDH
F: CACGTGAGCCTGTGCATCTTC
R:TTGGCTGTGCTCATCTAGTCCATC
F: GTCAGCCATTCATGCCTTGGTA
R: TCCGACCATAGGCTTTGCGTA
F: ACCAGTGGCAAGTGCTCCAAC