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癌症与分子诊断研究
(
网络版
), 2012
年
,
第
1
卷
,
第
1
-
6
页
Aizheng Yu Fenzi Zhenduan Yanjiu (Online), 2012, Vol.1, 1
-
6
http://cmdr.5th.sophiapublisher.com
3
图
1
不同
UV
剂量对
SW13
细胞凋亡的影响
注
: A: 10 J/m
2
剂量
UV; B: 20 J/m
2
剂量
UV; C: 30J/m
2
剂量
UV;
星号
*: UV
刺激后
24 h
的细胞凋亡率与没有进行
UV
照
射的细胞凋亡率相比有明显差异
(*, p<0.05; **, p<0.01)
Figure 1 The effect of different doses of UV on cell apoptosis
in SW13 cells
Note: A: 10 J/m
2
dose of UV; B: 20 J/m
2
dose of UV; C: 30
J/m
2
dose of UV; The asterisk * indicates there is significant
difference in rate of cell apoptosis exposed after 24 h UV
radiation comparing to that without UV radiation (*, p<0.05; **,
p<0.01)
2.56
倍和
6.91
倍。与
10 J/m
2
和
20 J/m
2
剂量照射结
果相比，细胞早期凋亡程度较高，照射
24 h
后差异
最为显著。因此，
30 J/m
2
UV
照射时
DNA
损伤程
度较为明显，为最适
UV
剂量。
1.2 SW13 (BRG1-/-)
细胞中表达
BRG1
可以明显降
低由
UV
照射引起的细胞凋亡
为了检测
BRG1
是否参与调控
DNA
损伤修复，
我们利用
BRG1
缺陷型的
SW13
细胞，体瞬时转染
BRG1
的表达质粒，检测
BRG1
在该细胞核内的表
达情况
(
图
2)
。
SW13
细胞系中无
BRG1
蛋白的表达，
在转染
BRG1
质粒的细胞中检测到大量
BRG1
蛋
白，确定了
BRG1
质粒的转染条件。
图
2 BRG1
在
SW13
细胞中的表达对细胞凋亡的影响
注
: A: Western Blotting
检测
BRG1
在
SW13
细胞中的表达情
况
; B:
在
SW13
细胞中瞬时转染
BRG1
表达质粒
,
检测细胞
早期凋亡率
;
星号
*: UV
刺激
24 h
后
,
转染
BRG1
的细胞凋
亡率与转染
pBJ5
细胞的凋亡率相比有明显差异
(*, p<0.05)
Figure 2 The effect of BRG1 expressed in SW13 cells on cell
apoptosis
Note: A: BRG1 expression in SW13 cells detected by Western
blotting; B: The rate of early cell apoptosis detected in the
SW13 cells with transiently transfecting BRG1 expressing
plasmids; The asterisk * indicates there is significant difference
in the rete of cell apoptosis of BRG1 transfected cells
comparing to that of pBJ5 transfected cells (*, p<0.05)
我们进一步将
BRG1
表达质粒瞬时转染到
SW13
细胞中，用
30 J/m
2
剂量的
UV
照射，分别在
0 h
、
6 h
和
24 h
检测细胞凋亡。结果表明，对照样
品的早期凋亡细胞在不同时间点分别为阴性对照的
2.55
倍、
3.62
倍和
6.07
倍；
BRG1
表达质粒转染的细
胞其凋亡程度分别为阴性对照的
1.24
倍、
1.47
倍和
3.74
倍。
BRG1
转染细胞的早期凋亡率明显下降，
在不同时间点相对凋亡率分别相差
1.31
倍、
2.15
倍
和
2.33
倍，
24 h
时差异最为显著。另外，对照组样
品凋亡程度呈明显上升趋势，说明
UV
照射后对照