医学检验检疫杂志
(
网络版
), 2012
年
,
第
1
卷
,
第
1
篇
,
第
1
-
6
页
Yixue Jianyan Jianyi Zazhi (Online), 2012, Vol.1, No.1, 1
-
6
1
技术主题
Technology Feature
PCR
技术在快速检测沙门氏菌中的应用
沈兰
,
王锐萍
,
史海涛
,
庞贤鹏
海南师范大学生命科学学院
,
海口
, 571158
通讯作者
:
haitao-shi@263.net
作者
医学检验检疫杂志
, 2012
年
,
第
1
卷
,
第
1
篇
doi: 10.5376/jmiq.cn.2012.01.0001
收稿日期:
2012
年
02
月
22
日
接受日期:
2012
年
05
月
25
日
发表日期:
2012
年
05
月
31
日
本文首次发表在《基因组学与应用生物学》
(2012
年第
31
卷第
1
期
90-94
页
)
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引用格式
(
中文
)
:
沈兰等
, 2012,
PCR
技术在快速检测沙门氏菌中的应用
,
医学检验检疫杂志
(
online) Vol.1 No.1 pp.1-6 (doi: 10.5376/jmiq. cn.2012.01.0001)
引用格式
(
英文
)
:
Shen et al., 2012, Applications of PCR Technologies on Rapid Detection of
Salmonell
,
Yixue Jianyan Jianyi Zazhi (online) Vol.1 No.1 pp.1-6 (doi:
10.5376/
jmiq.cn.2012.01.0001)
摘
要
本文总结了
PCR
检测沙门氏菌过程中被检目标基因的选择、引物的特异性以及国内外检测沙门氏菌的一些实例分
析了
PCR
检测沙门氏菌在引物选择上存在的问题,简述了在传统
PCR
技术基础上发展起来的检测沙门氏菌新方法。
关键词
沙门氏菌
;
被检目标基因
;
引物特异性
;
PCR
技术
Applications of PCR Technologies on Rapid Detection of
Salmonell
Shen Lan , Wang uiping , Shi Haitao , Pang Xianpeng
Centre for Viticulture & Enology, College of Life Sciences, Hainan Normal University, Haikou, 571158
Corresponding author,
haitao-shi@263.net
Authors
Abstract
This paper summarized the target gene selection and primer specificity in the PCR procedures of
Salmonella
detection.
Some practical case studies at home and abroad were listed as examples. We also analyzed the problems happened on primer
choosing in the PCR detection of Salmonella and introduced some modified approached for
Salmonella
detection developed based on
traditional PCR technologies.
Keywords
Salmonella
;
Target gene; Primer specificity; PCR technique
传统的沙门氏菌检测方法是以表面抗原为基
础,依靠生化反应和血清学实验进行检测
(
Shen et
al., 2011)
,
具有检测周期长、所需试剂繁多、费时、
敏感性低等缺陷。随着分子生物学技术的不断发展
和进步,针对沙门氏菌开展的快速检测方法得到迅
速发展,现代分子生物学技术如核酸杂交技术、限
制性片段长度多态性分析
(
RFLP)
、
核苷酸序列分
析、聚合酶链式反应
(
PCR)
技术等,已经在沙门氏
菌的准确、快速检测和鉴定中起重要的作用。
应用
PCR
技术检测沙门氏菌,主要集中在快速
检测体系的建立、检测灵敏度的提高上,其核心是
选择被检目标基因。本文概述了
PCR
技术在检测沙
门氏菌过程中目标基因的选择、存在的问题以及其
它检测沙门氏菌的技术与手段。
1
沙门氏菌被检目标基因选择及
PCR
检测实例
沙门氏菌的检测可以通过对多种特定基因的
PCR
检测,如编码
O
抗原基因,编码
H
抗原基因,
编码
vi
抗原的基因,与沙门氏菌致病性有关的基因
以及其它基因等,根据检测目的,可选择对不同基
因进行检测,从而达到在不同水平上检测和鉴定沙
门氏菌。
1.1
沙门氏菌属的检测
1.1.1
编码组氨酸操纵子基因的检测
组氨酸操纵子是细菌中控制组氨酸降解为可
利用碳源和氮源的遗传单位。黄金林等
(2002)
根据
沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计
PCR
引
物,成功扩增出
495
bp
的沙门氏菌特异条带,从
而建立了应用
PCR
进行沙门氏菌快速检测的方