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基因组学与生物技术
(
网络版
), 2014
年
,
第
3
卷
,
第
1-3
页
Jiyinzuxue Yu Shengwu Jishu (Online), 2014, Vol.3, 1-3
http://gb.biopublisher.cn
Copyright © 2014 Biopublisher
1
技术主题
Technology Feature
用扫描电子显微镜观察 Bt 菌的晶体蛋白形态的实验方法
周燕
1,2
，黄飞燕
1,2
，
李莉
1,2
，
赵从
2
，
朱锦天
2
1
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，广西大学生命科学技术学院，南宁，广西，中国
2
海南省热带农业资源研究所，三亚，海南，中国
通讯作者：
Crystal.Z.Chow@gmail.com
作者
基因组学与生物技术
, 2014
年
,
第
3
卷
,
第
1
篇
doi: 10.5376/gb.cn.2014.03.0001
本文首次以英文发表在
Bioscience Methods, 2014, Vol. 5, No. 1
上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用
Creative Commons Attribution License
协议对其进行授权，用中文再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用
,
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解有歧义，请以英文原文为准。
引用格式：
Zhou et al., 2014, The Protocol that Using Scanning Electron Microscope to Observe Crystal and Spore of
Bacillus thuringiensi
, Bioscience Methods,
2014, Vol. 5, No. 1 pp.1-3 ( doi: 10.5376/bm.2014.05.0001)
摘
要
利用扫描电镜能观察
Bt
菌株在芽孢形成过程中产生的伴胞晶体蛋白的形态，是鉴定
Bt
菌株的快速、直观的鉴定方
法。本实验方法是我们实验室用扫描电子显微镜观察
Bt
菌晶体蛋白和芽孢形态的常用实验方法。
关键词
Bacillus thuringiensis
;
扫描电子显微镜
;
伴胞晶体蛋白
;
芽孢形成
The Protocol that Using Scanning Electron Microscope to Observe Crystal and
Spore of
Bacillus thuringiensi
Yan Zhou
1,2
,
Feiyan Huang
1,2
,
Li Li
1,2
,
Cong Zhao
2
,
Jintian Zhu
2
1 State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources, College of Life Science and Technology of Guangxi University,
Nanning, Guangxi, China
2 Hainan Institute of Tropical Agricultural Resources (HITAR), Sanya, Hainan, China
Corresponding author, Crystal.Z.Chow@gmail.com;
Authors
Abstract
Using scanning electron microscopy can observe the crystal and spore that produced Bt strain during sporulation, which s
recognized the fastest and the most intuitive method for identifying Bt strain. This protocol is a routine method in our laboratory used
to observe morphology of Bt crystal protein and spore by the means of scanning electron microscope.
Keywords
Bacillus thuringiensis
; Scanning electron microscope (SEM); Parasporal crystal; Spore
引言
扫描电子显微镜利用电子与物质的相互作用
原理扫描样品表面，获取被测样品本身的各种物
理、化学性质的信息，如形貌、组成、晶体结构、
电子结构等。四氧化锇
(osmium tetroxide)
，亦称作
锇酸
(Osmic Acid, OsO
4
)
，是一种强氧化剂，与氮
原子有较强的亲和力，对细胞结构中的蛋白质成
分有良好的固定作用。利用锇酸固定晶体蛋白并
于扫描电子显微镜下观察的方法被广泛应用于观
察鉴定样本的表面结构与形状。
Bacillus thuringiensis
，简称
Bt
，是革兰氏阳
性、芽孢形成菌，。
Bt
菌有个显著的特征，能在芽
孢形成期产生杀死昆虫的伴胞晶体蛋白。利用扫
描电子显微镜观察
Bt
菌株在芽孢形成过程中产生
的伴胞晶体蛋白，是最直接、最有效鉴定
Bt
菌的
技术手段。本文报告了用扫描电子显微镜观察
Bt
菌芽孢和晶体的实验方法。
1 仪器设备及参数
本技术流程采用的扫描电镜型号为
TESCAN
VEGA 3
（图
1
），由捷克生产，广西医科大学实验
中心电镜室拥有。本实验使用的
TESCAN VEGA 3
扫描电镜的基本技术参数为：分辨率：高真空
(
二
收稿日期：
2014
年
05
月
05
日
接受日期：
2014
年
06
月
02
日
发表日期：
2014
年
06
月
15
日