基因组学与生物技术
(
网络版
), 2013
年
,
第
2
卷
,
第
7-10
页
Jiyinzuxue Yu Shengwu Jishu (Online), 2013, Vol.2, 7-10
http://gb.biopublisher.cn
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注意事项
首先,提取蛋白的过程中裂解要完全,这样
蛋白才能被完全释放。提取待观察的菌体的总蛋
白是关键,提取质量的好坏直接影响电泳的结果。
其次,过硫酸胺需要现配现用,它主要提供
自由基,在促凝剂
TEMED
的作用下催化丙烯酰
胺的聚合。
另外,加入浓缩胶时要缓慢均匀,且不能有
气泡,要及时插入梳子,还要防止浓缩胶飞溅及
梳子插入有气泡。
最后,染色和脱色环节也是相当重要的,如
果染色不够或是脱色不完全,蛋白条带将会变得
颜色浅且模糊。另一方面,为了得到漂亮的图片,
我们尽量不要两端的孔道,在拍照前一定要用蒸
馏水将蛋白胶清洗干净,使之无染色液存在,这
样拍照的背景颜色才会干净一致。
发表文献
Xuanjun Fang, Wang Xi, Wenfei Zhang, Liu Xie, 2013, Bt
S2096-2, A
Bacillus thuringiensis
Strain with Highly
Larvacidal Toxicity against Hookworm
Ⅱ
Rhabdi-
tiform Larva (
Necator americanus
), Bt Research, 2013,
Vol. 4, No. 4, doi: 10.5376/bt.2013.04.0004
致谢
这是
HITAR
实验室常用的用于
Bt
总蛋白分析的试验
方法,感谢
HITAR
允许将该方法公布。本工作是在广西
大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室进
行案例验证。在此表示感谢。
参考文献
Wang X., The Megaplamid profiles of 30 Wild
Bacillus
thuringiensis
Strains and their Toxic Activities of
Crystalline Proteins against Hookworm (
Necator
americanus)
[D]. Thesis for Master Degree, Guangxi
University, Supervisor: Dr. X.J Fang
Fang X.J., Wang X., Zhang W.F., and Xie L., Bt S2096-2,
A
Bacillus thuringiensis
Strain with Highly Larvacidal
Toxicity against Hookworm II Rhabditiform Larva
(
Necator americanus
) [J]. Bt Research, 2013, 4(4):
21-23.