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基因组学与生物技术
(
网络版
), 2013
年
,
第
2
卷
,
第
7-10
页
Jiyinzuxue Yu Shengwu Jishu (Online), 2013, Vol.2, 7-10
http://gb.biopublisher.cn
Copyright © 2013 Biopublisher
7
技术主题
Technology Feature
用
SDS-PAGE
电泳分析
Bt
菌伴胞晶体蛋白组的方法
周燕
1,2
，黄飞燕
1,2
，
李莉
1,2
，
赵从
2
通讯作者：
Crystal.Z.Chow@gmail.com
作者
1
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，广西大学生命科学技术学院，南宁，广西，中国
2
海南省热带农业资源研究所，三亚，海南，中国
基因组学与生物技术
, 2013
年
,
第
2
卷
,
第
3
篇
doi: 10.5376/gb.cn.2013.02.0003
本文首次以英文发表在
Bioscience Methods, 2013, Vol. 4, No.1
上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用
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,
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解有歧义，请以英文原文为准。
引用格式：
Zhou, 2014, Protocol of SDS-PAGE for Proteomic Analysis of Bt Parasporal Crystals, Bioscience Methods, 2013, Vol. 4, No.1, 1-4 (doi:
10.5376/bm.2013. 04.0001)
摘
要
利用
SDS-PAGE
电泳技术能有效观察
Bt
菌株在芽孢形成期产生伴胞蛋白的蛋白组情况
(proteomic profile)
，是直接
了解
Bt
菌伴胞蛋白特征、特性的有效方法。但是
SDS-PAGE
电泳技术操作较为复杂、实验结果易受试验条件、
多种试验
因素的影响。本文报告了用
SDS-PAGE
电泳技术获得理想实验结果的分析
Bt
伴胞蛋白谱的实验方法和技巧。案例研究证实
本报告的实验方法获得的结果可靠、稳定、具有较好的可重复性。
关键词
Bacillus thuringiensis
; SDS-PAGE
电泳
;
伴胞晶体
;
蛋白组
Protocol of SDS-PAGE for Proteomic Analysis of Bt Parasporal Crystals
Yan Zhou
1,2
, Feiyan Huang
1,2
, Li Li
1,2
, Cong Zhao
2
,
1. State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-Bioresources, College of Life Science and Technology of Guangxi University,
Nanning, Guangxi, China
2. Hainan Tropical Agricultural Resources Institute, Sanya, Hannan, China
Corresponding author, Crystal.Z.Chow@gmail.com;
Authors
Abstract
Proteomic profiling is recognized as an effective way to directly understand the characteristics of parasporal protein, and
SDS-PAGE technique can be used effectively to observe the parasporal proteins (proteomic profile) in Bt strain. However, the
manipulation of SDS-PAGE electrophoresis is complex, while the experimental results are susceptible to experimental conditions as
well as some experimental factors. This paper presents an experimental protocol and techniques of SDS-PAGE that can be used to
obtain good results for genomic analysis of insecticidal crystal proteins formed by Bt during sporulation. Case study confirmed that
the results generated by this protocol are reliable, stable, and reproducible.
Keywords
Bacillus thuringiensis
; SDS-PAGE; Parasporal crystals
;
Proteome
引言
Bacillus thuringiensis
，简称
Bt
，是革兰氏阳
性、芽孢形成菌，其显著的特征是能在芽孢形成
期产生使昆虫致死的伴胞晶体蛋白质。了解
Bt
菌
在芽孢形成期产生的伴胞晶体蛋白组，就可以了
解该
Bt
菌可能产生伴胞蛋白的种类和数量以及遗
传多样性。因此，
SDS-PAGE
电泳技术成为
Bt
菌
伴胞晶体蛋白研究的最常用的方法之一，也是分
离制备伴胞晶体蛋白的技术手段。
SDS-PAGE
电
泳技术是基于不同的蛋白质由于电泳迁移率不同
而被分离的一种实验技术，常用于鉴定各种生物
的蛋白质组分及分子量大小。实验结果易受试验
条件、
多种试验因素的影响。本文报告了用
SDS-PAGE
电泳技术获得理想实验结果的分析
Bt
伴胞蛋白谱的实验方法和技巧。
1
仪器设备及操作
本实验采用
BIO-RAD Mini-PROTEAN®
收稿日期：
2013
年
11
月
20
日
接受日期：
2013
年
12
月
15
日
发表日期：
2013
年
12
月
26
日