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乔燕春等：茄子花药培养技术研究
1141
年在蒙自种植
2
个不育系，黎榆
A
和榆密
15A
及
其相应保持系黎榆
B
和榆密
15B
，在开花期将不育
系植株上开放过的颖花剪去后，对不育系的稻穗进
行剪颖处理，并用相应的保持系与之套袋授粉，不
育系与保持系杂交便获得新一代不育系种子。于
2009
年在昆明种植这
2
个不育系及其保持系，采用
相同的繁殖方法，繁殖
2
个不育系群体。
把蒙自和昆明繁殖的
2
个不育系种子分别在
2008
年和
2010
年种植，在开花期对繁殖不育系群
体进行检查，出现花药开裂散粉而外观性状与保持
系相似的单株，视为可育株。将可育株上正开放和
已开过的颖花剪去，并进行套袋处理，即可获得自
交后代
S
1
。同时，用可育株给相应的不育系授粉，
可获得回交
F
1
代，又给另外
2
个滇
1
型不育系
(
滇
系
5
号
A
和合系
42A)
授粉杂交获得
F
1
代。次年
(2009
年和
2011
年
)
在昆明种植自交
S
1
、测交
BCF
1
代和
杂交
F
1
代。
3.3.2
检测花粉的育性及结实率
检测各个可育株的套袋结实率和花粉育性，以
及各个
S
1
、
BCF
1
和
F
1
群体的套袋结实率。花粉育
性鉴定和结实率分析方法同文建成等
(2008)
。
3.3.3
恢复基因位点的分子标记分析
采用
CTAB
法
(Murry and Thompson, 1980)
，分
别提取在蒙自和昆明用于繁殖
2
个不育系群体的父
本保持系单株的叶片总
DNA
，以及在不育系繁殖群
体中产生的可育株的叶片
DNA
。利用与水稻
Rf-1
恢复基因连锁的共显性
CAPS
标记
M49609
Bst
UI
进
行基因型分析，标记系列根据
Komori
等
(2004)
的报
道。
PCR
反应程序同文建成等
(2008)
。
作者贡献
张江丽和文建成是本研究的实验设计和实验研究的执
行人；张江丽完成数据分析，论文初稿的写作；李娟、孙朝
华、谭亚玲参与实验结果分析；黄大军、普世皇、金寿林参
与大田试验；谭学林和陈丽娟参与项目的构思和实验设计；
文建成是项目的负责人，指导实验设计，数据统计，论文写
作与修改。全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究得到了云南省教育厅重点基金项目
(2011Z039)
、
国家自然科学基金项目
(31060088)
和云南省科技计划项目
(2009BB007)
的共同资助。
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