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分子植物育种
(
网络版
)
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online)
1132
子为试材利用小孢子培养技术获得再生植株，刘独
臣等
(2008)
以茄子为试材进行花药培养，成功建立
了茄子花药培养胚状体诱导成苗的技术体系；连勇
等
(2004)
利用直接游离小孢子培养的方法经愈伤
组织得到四倍体杂种植株小孢子的再生植株；赵福
宽等
(2001)
用低温胁迫处理进行花药培养诱导花
药形成耐冷性愈伤组织，其分化出的再生植株低温
伤害率明显低于原品种，为抗寒茄子材料的筛选奠
定了基础。程继鸿等
(2001)
在花药培养接种后，用
1 000 Lx
弱光胁迫培养不等天数，获得了大量茄子
耐弱光的细胞变异系，为茄子耐弱光遗传资源的筛
选奠定了一定的基础。
茄子组织培养和花药培养技术已经取得了长
足的发展，但受不同基因型材料和环境条件的影
响，我们在进行茄子的组织培养过程中，将前人的
研究结果应用到本研究材料，很难获得理想的结
果，甚至组织不发育。为此本研究针对供试材料进
行了合理的设计，最终目标是筛选适合本实验材料
基因型的培养基，建立茄子花药培养技术体系。
1
结果与分析
1.1
花粉萌发活力研究
本研究利用花粉萌发测定法对供试材料进行
花粉活力的测定，以进一步确定材料的生长环境
是否是花粉活力较为活跃的时期。花粉材料选在
晴天的上午
10
点采集，选用
0.5%
琼脂
+10%
蔗糖
+0.03%
硼酸
+0.05% Ca(NO
3
)
2
·4H
2
O
和
0.5%
琼脂
+10%
蔗糖
+1%
硼酸两种花粉萌发的培养基，通过
多次重复实验，在茄子花粉萌发的培养基中，加入
Ca(NO
3
)
2
·4H
2
O
抑 制 了 花 粉 的 萌 发 ， 在 不 加
Ca(NO
3
)
2
·4H
2
O
的培养基中花粉正常萌发，花粉萌发
0.5 h
，
2 h
，
4 h
，
8 h
花粉萌发的情况
(
图
1;
表
1)
，经
试验结果可知，具有高萌发活力的花粉，才能在花
药培养中其小孢子具有较高的活力，进入愈伤组织
状态的花药比例较多，说明该时期的花药适合进行
花药培养。
1.2
花药培养技术研究
本研究对供试的十份材料进行花药培养技术
研究。结果显示，茄子对温度较为敏感，低于
20
℃
和高于
32
℃的温度都不适合茄子的花粉萌发，花萼
较萼洼高
1~2 mm (
未展开的花蕾
)
多数茄子的花粉
粒处于单核靠边期，适于进行花药培养。进一步确
定了愈伤组织诱导培养基：
MS+1mg/LKT+0.5 mg/L
2,4-D+0.25 mg/L TDZ+8 mg/L Vc+3%
糖
+ 6 g/L
琼
脂
+8%
椰乳，初始分化培养基为
MS+2 mg/L
6-BA+0.01 mg/L NAA+0.005 μg/L BR+8 mg/L
Vc+2%
糖
+6 g/L
琼脂
+6%
椰乳。生根培养基为
1/4MS+0.1 mg/L IBA+2%
糖
+6 g/L
琼脂。在本实验确
定的花药培养的培养基中
(
图
2)
，成株数和成苗数比
较低，关键是芽分化的质量较差，成苗率很低，达
不到生产的要求。
为了进一步提高芽分化的质量，提高成苗率。
本实验进一步对芽分化的培养基和不同基因型的
材料进行了研究。由于工作量大，本实验仅对四种
不同基因型的茄子材料进行芽分化培养基的筛选。
并利用筛选的较好的培养基作为
10
份材料的固定
培养基。本实验设了
17
个梯度，供试材料
(
表
2)
为紫
荣
6
号、
S47A
、绿霸、长丰
2
号，经过芽分化情况比
较。
8
号培养基在四种不同基因型材料中分化相对
较理想；
1
号培养基生长缓慢，且组织瘦弱；
2-5
号
培养基分化能力较弱，多数组织存在褐化的现象；
6-11
号培养基中加入
BR
之后，分化能力明显得到改
善，但
BR
是一种非常敏感的激素。和
6-BA
共同作
用，
8
号培养基较其他组合的培养基褐化较少，组
织发育相对较好。
12-17
号培养基中引入
TDZ
之后，
有助于不定芽的萌发。尤以
14
号培养基组合较为理
想，但使用
14
号培养基后，在根分化过程中，茎不
延长，根分化较难，必须在芽分化过程中在茎延长
培养基中过渡，才能发育出根，进一步发育出完整
的植株。所以本实验确定的最适合的芽分化培养基
为
8
号培养基即
MS+0.1 mg/LNAA+2 mg/L 6-BA
+0.01 μg/L BR (
表
2)+ 2%
糖
+6 g/L
琼脂
+ 6%
椰乳。
表
1
茄子花粉的萌发情况
Table 1 Eggplant pollen germination
编号
No.
材料
Material
时间
(h)
Time (h)
花粉的萌发率
(%)
Pollen germination rate (%)
1
紫荣
6
号
zirongNO.6
0.5
3
2
85
4
88
8
89
2
S47A 0.5
4
2
87
4
88
8
88
3
绿霸
Lvba
0.5
5
2
86
4
87
8
89
4
紫荣
7
号
zirong NO.7
0.5
3
2
87
4
88
8
90