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乔燕春等：茄子花药培养技术研究
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的平衡，提高芽分化的能力。本研究进一步研究了
提高茎延长的培养基，提高了芽分化的质量和形成
完整植株的比例。
本研究在前人研究的基础上，对激素的使用和
配比进行了研究，确定了花药培养芽分化的培养
基。同时研究结果发现，我们在选择材料时，用品
种作为研究材料。由于目前的品种多为
F1
代，杂合
度较高，使得我们筛选的培养基不能完全适合所有
的材料使用，这也是目前关于茄子花药培养的文献
较多，但实际应用生产还存在一些问题。可见
F1
代
的材料并不是最理想的研究材料，为此我们请教了
北京农林科学院蔬菜研究中心的张凤兰研究员，她
的经验认为
F3
代的材料可作为花药培养较理想的
材料。这也是我们今后研究进一步需要改进的方
向。同时利用花药培养，不可避免的有花药壁等组
织的干扰，使得培养的材料很难区分双单倍体和二
倍体，今后研究的方向需要从游离小孢子途径多做
尝试，提高单倍体育种的利用潜力。
3
材料与方法
3.1
材料
3.1.1
花药培养材料
材料为华南地区主要栽培茄子，主要有紫荣
6
号、紫荣
7
号，
S47A
绿茄、绿霸、黑茄
1
号、长丰
2
号、竹料白茄、翡翠绿茄、
D006
和
M3
共计
10
份材
料，取花瓣未展开，花瓣高于萼洼处
2-3 mm
的未成
熟的花蕾。
3.1.2
培养基
花药培养基：愈伤组织诱导培养基：①
MS+
1 mg/L KT+0.5 mg/L 2,4-D+0.25 mg/L TDZ+8 mg/L
Vc+3%
糖
+6g/L
琼脂
+8%
椰乳。初始芽分化培养基为
MS+2 mg/L 6-BA + 0.01 mg/LNAA +0.005 μg/L BR
+8 mg/L Vc+2%
糖
+6g/L
琼脂
+6%
椰乳。
芽分化诱导培养基的筛选：①
MS
，②
MS+0.5 mg/L
6-BA
，③
MS+0.1mg/LNAA+ (0.5 mg/L, 1mg/L, 2mg/L)
6-BA
，④
MS +(0.5 mg/L, 1 mg/L, 2 mg/L) 6-BA+
(0.01 μg/L
，
0.02 μg/L) BR+0.01 mg/L NAA
，⑤
MS
+(0.5 mg/L, 1 mg/L, 2 mg/L) 6-BA+ (0.1 mg/L, 0.5 mg/L)
TDZ+0.1 mg/L NAA (
每个培养基加
8 mg/L Vc+2%
糖
+6 g/L
琼脂
+6%
椰乳
)
。
茎伸长培养基：
MS+0.1 mg/L NAA+(0.5 mg/L,
1 mg/L, 2 mg/L) 6-BA+(0.5 mg/L, 1 mg/L) GA3
。
生根培养基：
(1/4~1/2)MS+(0.1mg/L, 0.2 mg/L)IBA
。
3.2
方法
3.2.1
花药培养预处理和消毒方法
试材取自广州市农业科学研究院花都基地，常
规田间管理。上午
10
点取健壮植株上未展开的花
蕾，花药基本形态特征为：颜色淡花色，未展开的
花瓣高于萼洼处
2-3 mm
，该时期多数处于单核靠边
期，
4
℃低温处理
24 h
，
70%
的乙醇消毒
30 s
，
0.1%
HgCl
2
处理
8 min
，无菌水冲洗
3
次，将花药接种到愈
伤组织培养基上进行培养。
3.2.2
花粉活力测定
对供试材料处于盛花期的茄子花粉进行花粉
活力测定，采用花粉萌发测定法进行花粉生活力观
察 。
(0.5%
琼 脂
+10%
蔗 糖
+0.03%
硼 酸
+0.05%
Ca(NO
3
)
2
·4H
2
O
和
0.5%
琼 脂
+10%
蔗 糖
+1%
硼
酸
)25
℃暗培养
0.5 h
，
2 h
，
4 h
，
8 h
进行显微观察。
3.2.3
茄子花药培养
消毒的花药切去花丝，并将花药一切为二接种
到愈伤组织培养基上，进行愈伤组织诱导。诱导的
愈伤组织培养
2-3
代后，将愈伤组织剥离成小块接种
到芽分化培养基上，进行芽分生组织的诱导，进一
步分化芽，转到增殖培养基上进一步分化，分化的
芽长到
3 cm
的单苗时转到根分化培养基，进一步培
养成完整的植株。
作者贡献
乔燕春是本研究的方案设计和直接实施者，完成论文
初稿，曹翠文和李光光协助本项目的实施和开展，林鉴荣
提供研究材料，并参与此课题研究。全体作者阅读并同意
最终文本。
致谢
本研究由广州市科信局应用基础项目
(2010Y1-C831)
资
助。在此，感谢中国蔬菜花卉研究所连勇研究员和北京农林
科学院蔬菜研究中心张凤兰研究员的帮助。
参考文献
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