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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1323
-
1330
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1323
-
1330
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1324
的真实性和纯度成为可能。
SSR (Simple sequence repeat)
分子标记具有重
复性好，操作简单，呈共显性等优点，而且数量丰
富，技术较为成熟，已被广泛地应用于玉米、水稻
等农作物的品种真实性和纯度鉴定上
(
王凤格等
,
2003;
李云海等
, 1999)
。运用
SSR
分子标记检测杂
交种，一般需要提供亲本，在已知亲本的前提下筛
选引物，鉴定品种纯度和真实性是十分有效的。
然而，在国家级、省级新品种区试中，参试单
位无须提供参试品种的亲本材料，因此，这就需要
在无亲本的情况下做纯度检测。本课题在多年国家
棉花区试参试品种的纯度检测工作中积累经验，筛
选出一批核心引物，已应用于
700
多个棉花材料上，
取得了较好的效果。在杂交种的鉴别工作中，在无
亲本信息或亲本材料的情况下，
SSR
引物扩增在供
试材料中呈现共显性或非共显性，非共显性表明该
SSR
座位在该材料的两亲本无差异。显然，呈共显
性的引物数量越多，表明两亲本的
SSR
多样性丰
富，亲缘关系越远，杂种的优势更好。
本研究通过对邯
6402
杂交种的
F
1
单株、
F
2
群
体
(44
个单株
)
指纹图谱的构建，比对单株间的图谱
差异，试图利用
SSR
核心引物构建品种的指纹图
谱，鉴别常规棉品种和杂交棉品种，区分
F
1
代杂交
种和
F
2
代分离群体。
1
结果分析
1.1
邯
6402 F
1
的纯度检测
应用
17
对
SSR
核心引物检测邯
6402 F
1
SSR
标
记纯度，纯度达
100%
，其中表
1
中前
12
对引物
F
1
呈共显性，后
5
对引物呈非共显性。图
1
、图
2
、
图
3
和图
4
分别显示在引物
NAU2343
、
NAU1255
、
NAU1186
和
NAU1369
的扩增下，
F
1
24
株棉花
SSR
扩增谱带一致，说明没有杂株，表明
F
1
在分
子水平上纯度一致。其中
NAU2343
、
NAU1255
、
NAU1186
三对引物在
F
1
中呈共显性，而
NAU1369
在
F
1
中扩增呈非共显性。
1.2
邯
6402 F
1
的
SSR
指纹图谱的构建
在检测
SSR
标记纯度的同时，完成了
F
1
的
17
对
SSR
引物的指纹图谱，把电泳带谱信息转化成相
应的数字编码表示
(
表
1)
，从而构成品种独一无二的
身份标识，能作为品种真实性鉴定的依据，可以区
别于其它品种。
图
1
棉花杂种
F
1
和
F
2
分离株在引物
NAU2343
扩增下的
SSR
图谱
注
: M: DNA marker;
上图
1~24
株为
F
1
的谱带
,
均为Ⅲ型
;
下图
1~44
株为
F
2
的谱带
,
分别为Ⅰ
,
Ⅱ
,
Ⅲ型
;
其中Ⅰ型
: 2, 5, 7,
10, 16, 17, 20, 34, 36, 43;
Ⅱ型
: 3, 4, 9, 11, 13, 14, 21, 26, 30, 37, 44;
Ⅲ型
: 1, 6, 8, 12, 15, 18, 19, 22, 23, 24, 25, 27, 28, 29, 31, 32,
33, 35, 38, 39, 40, 41, 42
Figure 1 Banding patterns of F
1
hybrids and F
2
segregants generated by the SSR primers of NAU2343
Note: M: DNA marker; Banding patterns of hybrid F
1
individuals 1~24 (above), assigned as type III; Banding Patterns of F
2
separating individuals 1~44 (below), assigned as type
Ⅰ
,
Ⅱ
and
Ⅲ
; Type
Ⅰ
: 2, 5, 7, 10, 16, 17, 20, 34, 36, 43; Type
Ⅱ
: 3, 4, 9,
11, 13, 14, 21, 26, 30, 37, 44; Type
Ⅲ
: 1, 6, 8, 12, 15, 18, 19, 22, 23, 24, 25, 27, 28, 29, 31, 32, 33, 35, 38, 39, 40, 41, 42