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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1553
-
1558
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1553
-
1558
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1556
图
4 2 mg/L 6
-
BA
与
2,4
-
D
的组合对草地早熟禾愈伤组织分
化的影响
注
: 1:
帝王
; 2:
盛宴
; 3:
超级伊克利
; 4:
布鲁克
; 5:
克尼尔沃特
;
6:
蓝鸟
;
Ⅳ
: 2 mg/L 6
-
BA;
Ⅴ
: 2 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅵ
: 2 mg/L 6
-
BA+0.2 mg/L 2,4
-
D
Figure 4 Effect of 6
-
BA (2 mg/L) and 2,4
-
D combination on
callus differentiation in different varieties of Kentucky Bluegrass
Note: 1: Diva; 2: Feastbrand; 3: Total eclipse; 4: Brooklawn; 5:
Clear water; 6: Blue bird;
Ⅳ
: 2 mg/L 6
-
BA;
Ⅴ
: 2 mg/L 6
-
BA+
0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅵ
: 2 mg/L 6
-
BA+0.2 mg/L 2,4
-
D
图
5 0.1 mg/L 2,4
-
D
与
6
-
BA
的组合对草地早熟禾愈伤组织
分化的影响
注
: 1:
帝王
; 2:
盛宴
; 3:
超级伊克利
; 4:
布鲁克
; 5:
克尼尔
沃特
; 6:
蓝鸟 Ⅰ
: 0.5 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅲ
: 1 mg/L
6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅴ
: 2 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D
Figure 5 Effect of 2,4
-
D (0.1 mg/L) and 6
-
BA combination on
callus differentiation in different varieties of Kentucky Bluegrass
Note: 1: Diva; 2: Feastbrand; 3: Total Eclipse; 4: Brooklawn; 5:
Clear water; 6: Blue bird;
Ⅰ
: 0.5 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅲ
: 1 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D;
Ⅴ
: 2 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L
2,4
-
D
定、廉价等特点，在组培研究中被广泛采用。
2,4
-
D
是植物组培过程中常用的生长素，稳定性高、耐热
性强，具有较强的组培启动能力，有促进细胞生长、
分裂、生根的作用。与细胞分裂素横向扩大增粗细
胞不同，生长素促进细胞纵向伸长以增大细胞体
积。因此，两者合适的比例会有助于愈伤组织细胞
的分化和植株再生。本研究发现，
2 mg/L 6
-
BA
对大
多数草地早熟禾的愈伤组织的分化促进效果最佳；在
2 mg/L 6
-
BA
上添加少量
2,4
-
D
对部分品种的草地
早熟禾愈伤组织分化亦有促进作用，如
“
帝王
”
与
“
蓝
鸟
”
在添加
0.2 mg/L 2,4
-
D
使分化率分别提高了
20%
和
23.3%
；反之，在
0.1 mg/L 2,4
-
D
上添加
6
-
BA
时，
6
-
BA
浓度越高，品种分化的几率越大，如
“
蓝鸟
”
在
添加
2 mg/L 6
-
BA
后，分化率比添加
0.1 mg/L
和
1 mg/L
的
6
-
BA
分别提高了
4
倍左右。从另外一个
角度分析，不同的品种对激素的敏感性存在很大不
同，如
“
克尼尔沃特
”
对
2,4
-
D
比较敏感，
“
蓝鸟
”
需
要一定浓度的
6
-
BA (2 mg/L)
，
“
超级伊克利
”
需要一
定的
6
-
BA/2,4
-
D
比例
(20 X)
，而
“
帝王
”
需要较高浓
度的
6
-
BA
和
2,4
-
D
，
“
布鲁克
”
只能在特定
6
-
BA
和
2,4
-
D
浓度下
(2 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D)
才能分
化和再生。这一现象在另外一些早地早熟禾品种的研
究中也得到了验证
(
高丽美
, 2007;
马忠华等
, 1999;
麻冬梅等
, 2008; Valk et al., 1995)
，并且，在苎麻、玉
米、水稻的愈伤组织分化研究中也有类似的报道
(
王
晓玲和彭定祥
, 2005;
夏燕莉
, 2002;
郭蕾等
, 2006)
。
除了激素的影响作用，草地早熟禾的愈伤组织
分化和再生也受其它因素的影响，如陈智勇等
(2007)
利用三种培养基
MS
、
CC
、
NB
研究了
“
优异
”
、
“
巴林
”
、
“
肯塔基
”
的分化再生，发现在三种培养基上的平均
分化率分别为
22.61%
、
35.22%
和
79.31%
。因此，在
建立草地早熟禾再生体系时，要综合考虑各种因素
的影响，最大限度地挖掘最适条件，以提高愈伤组
织细胞分化和植株再生的几率，促进草坪草品种改
良的基因工程研究。
3
材料与方法
3.1
试验材料
选取生产上常用的
6
个草地早熟禾品种：帝王
(Diva)
、盛宴
(Feast brand)
、超级伊克利
(Total Eclipse)
、
布鲁克
(Brook lawn)
、克尼尔沃特
(Clearwater)
、蓝鸟
(Bluebird)
，以成熟种子
(
购自中种公司
)
作为外植体诱
导愈伤组织。
3.2
愈伤组织分化优化实验
选取较为干燥、致密、淡黄色、大小均匀一致
且生长状态良好的愈伤组织细胞，放置于分化培养
基上进行分化和再生研究。分化培养基设置
7
种处
理组合，分别由
MS
培养基与不同激素组合而成
(
表
2)
。每个培养皿接
10
块愈伤组织，每
3
周继代一