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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1553
-
1558
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1553
-
1558
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1554
高效率的组织培养体系是进行基因工程育种
中的重要环节。目前有部分实验室从一定层面对个
别早熟禾品种开展了再生体系的研究，包括培养基
的筛选
(
陈智勇等
, 2007)
、激素的优化
(
高丽美
, 2007;
马晖玲等
, 2009;
马忠华等
, 1999;
麻冬梅等
, 2008;
皮伟等
, 2004; Valk et al., 1995)
等。结果显示，不同
品种的组培体系存在较大的差异，特别是植株分化
再生环节。本研究拟对生产上常用的
6
个草地早熟
禾品种再生体系进行系统研究，以期建立这些品种
的高效再生体系，探讨早地早熟禾再生体系的特点，
为进一步开展这些品种的基因工程育种奠定基础。
1
结果分析
1.1
不同品种草地早熟禾愈伤组织分化率比较
早熟禾的种子在诱导培养基上暗培养约
40 d
后，
陆续产生白色或淡黄色的非胚性愈伤组织，其表面
湿润，质地疏松且呈透明状。继代培养至
2
个月以后，
愈伤组织颜色变为浅黄色，表面干燥且有颗粒状突
起，体积增大至
5 mm
左右。挑选块状愈伤组织于
分化培养基上生长，光照处理
3
周左右，部分愈伤组
织上长出绿芽，转接到生根培养基后均能生根成苗
(
图
1)
；部分愈伤组织维持状态不变或长出白色的根
毛，这些愈伤组织块均不能继续分化出小苗。
计算不同品种的分化再生频率发现，不同草地早
熟禾品种间存在较大差异
(
表
1)
：有些品种容易分化
和再生，如“帝王”、“超级伊克利”、“蓝鸟”等，在
各种处理下都有愈伤组织分化和再生，而“盛宴”、
“布鲁克”等则只在特定条件下才能分化和再生。再
生率最高的是“蓝鸟”
(60%)
，其不同处理下分化再
生频率的均值也达到了
25.57%
，其次为“超级伊克
利”和“帝王”，再生率分别达到
35.7%
和
46.7%
，
不同处理下的均值分别为
23.20%
和
22.80%
。
比较分化再生过程中的几种组合处理发现，不同
处理对分化再生的频率影响很大。其中处理组合Ⅴ
(2 mg/L 6
-
BA+0.1 mg/L 2,4
-
D)
适合于所有检测的品
种，表明不同品种对这一组合处理的广泛适应性；而
组合Ⅰ的表现最差，有一半品种没有分化，分化品种
的分化率也都较低
(10%
以下
)
；组合处理Ⅳ和Ⅵ中虽
然都有
2
个品种不能分化，但其它品种的分化率都较
高，显示出品种差异对组合处理的敏感性。
1.2
单独使用
6
-
BA
对草地早熟禾愈伤组织分化的
影响
实验设计了
2
个浓度梯度，分别为
2 mg/L
和
3 mg/L
。由图
2
可以看出，不同品种草坪草品种的
愈伤组织分化对
6
-
BA
比较敏感，其中，“盛宴”和
“布鲁克”在单独使用
6
-
BA
时愈伤组织不能分化，
“帝王”和“蓝鸟”愈伤组织的分化率随着
6
-
BA
浓
度升高而增加，“超级伊克利”和“克尼尔沃特”则
随着
6
-
BA
浓度升高而降低。
1.3 1 mg/L 6
-
BA
基础上添加
2,4
-
D
对草地早熟禾
愈伤组织分化的影响
1 mg/L 6
-
BA
的基础上分别添加
0.05 mg/L
和
0.1 mg/L 2,4
-
D
，结果发现，补加较高浓度
2,4
-
D
会
抑制“帝王”、“超级伊克利”的分化率，而在“克尼
尔沃特”和“蓝鸟”中分化率稍有提高，对“盛宴”
和“布鲁克”没有影响
(
图
3)
。
1.4 2 mg/L 6
-
BA
基础上添加
2,4
-
D
对草地早熟禾
愈伤组织分化的影响
于
2 mg/L 6
-
BA
下加不同浓度
2,4
-
D (0, 0.1 mg/L
和
0.2 mg/L)
，发现不同品种品种的反应不同：较高
图
1
草地早熟禾品种
“
蓝鸟
”
愈伤组织分化和再生过程
注
: A:
愈伤组织
; B:
分化的愈伤组织
; C:
长成植株的幼苗
Figure 1 Callus differentiation and plant regeneration of variety “Bluebird”
Note: A: Callus; B: Differentiated callus; C: Regenerated plant