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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1535
-
1541
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1535
-
1541
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1540
2.0 µL 10
×
PCR Buffer
，
1.6 µL dNTP (2.5 mmol/L)
，
0.3 µL
的
Taq DNA
聚合酶
(5 U/µL)
，
0.7 µL
的随机
引物
(10 mmol/L)
，
13.4 µL
的
ddH
2
O
补足反应体系。
PCR
的扩增反应程序如下：首先
94
℃预变性
4 min
，后
94
℃变性
45 s
，
38
℃退火
1 min
，
72
℃延伸
1.5 min
，进行
40
个反应循环，最后
72
℃延伸
10 min
，
在
4
℃保存。
扩增产物用
1.5%
琼脂糖凝胶在
1
×
TAE
电泳缓
冲液中进行电泳，电场为
5 V/cm
，电泳后用
EB
染色，
用
UVP GelDoc-It
凝胶成像系统拍照记录。
3.5
数据处理与分析
对凝胶电泳成像图进行人工读带，将成像图上可
重复的、清晰的扩增条带计为“
1
”，同一扩增位点处
无条带或肉眼不易分辨的弱带计为“
0
”，建立原始
矩阵。使用
SPSS18.0
软件分析其
Jaccard
遗传系数，
采用
UPGMA
法进行测试样本的聚类分析，建立聚
类树状图。
作者贡献
陈志丹、李振刚和孙威江是本研究的实验设计和实验研
究的执行人；陈志丹、李振刚完成数据分析，论文初稿的写
作；孙威江是项目的构思者及负责人，指导实验设计，数据
分析，论文写作与修改。全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由国家科技部科技项目
(2010DFB330304,
S2011C400031, 2011BAD01B01)
和福建省农业科技重大项
目
(2011N5006)
共同资助。
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