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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1518-1525
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1518-1525
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1520
图
2 9
对引物对两个池的扩增图谱
注
:
两个为一组
,
每组顺序分别为亲和性优良的
85-1
和亲和
性较差的
B717; M: DNA marker; Y1~Y9
为差异条带
;
其余为
扩增出的相同条带
;
右下部分为无条带
Figure 2 DNA pools amplified with nine pairs of primers
Note: Two lanes as a group, each group places an melon 85-1
and B717 in turn; M: DNA marker; Y1~Y9 indicates the pri-
mers with amplified differential bands, and the rest shows no
difference in band; The blank of the right lower parts shows no
amplified bands
图
3
引物
Y1 (CMN
-
0616)
和
Y2 (M103)
在部分
F
2
单株中的验证
注
: M: DNA ladder marker; 1:
亲和性优良的
85-1; 2:
亲和性
较差的
B717; 3~7:
为
F
2
群体中随机选择的单株
;
其中
Y1
为
CMN-0616
、
Y2
为
M103
Figure 3 Verification of primer Y1 (CMN
-
0616) and Y2(M103)
in part of F
2
individual plants
Note: M: DNA ladder marker; 1: Excellent affinity varieties
85-1; 2: Poor affinity varieties B717; 3~7: Individual plants
selected from F
2
population in random; Y1 is CMN
-
0616, Y2
is M103
2
讨论
目前嫁接栽培已经在我国西甜瓜大田生产中
得到了广泛应用，尤其在我国南部海南省、中部厚
薄皮混杂种植区
(
江苏南通及长三角地区
,
安徽和
县
,
河南洛阳等
)
、黄河以北的薄皮甜瓜区等应用较
多。近年来，甜瓜嫁接研究已经从以往的单纯生理
方面深入到分子水平，研究内容也相应的从简单的
提高植株抗逆性、提高产量等方面扩展到具体的嫁
接基因亲和性方面，从对薄皮甜瓜的大量研究
(
齐红
岩
, 2010;
陈友根等
, 2008)
延伸到厚皮甜瓜上，在以
往筛选优良砧木接穗组合、考察嫁接植株生长发育
状况的基础上，进一步探讨嫁接植株间的分子机
理；与此同时，导致不同砧木接穗嫁接组合表现不
同嫁接优势的原因以及嫁接能够提高作物抗逆性、
提高产量的具体过程是什么，具体机理是如何运作
的等一系列问题也一直令广大学者百思不得其解。
目前，各种分子技术在葫芦科作物上已经开展
了诸如种质亲缘关系鉴定、遗传图谱构建、基因标
记与转基因等方面的研究，且随着
SSR
、
AFLP
、
ISSR
和
SRAP
等技术的不断成熟，其应用在各个研究、
各个领域仍在逐步扩大。张桂华等
(2004)
借助分子
标记对育种材料从
DNA
分子水平上进行选择，标记
了与黄瓜白粉病抗性相关基因连锁的
AFLP
标记，
连锁距离为
5.56 cm
，从而更有效地筛选高产高抗优
质品种，提高育种效率。陈飞雪等
(2008)
用黄瓜耐
高温自交系
863-7
和不耐高温自交系
863~6
构建
F
2
群
体寻找与黄瓜耐高温连锁的分子标记，用
62
对
SSR
引物和
132
对
SRAP
引物进行多态性筛选，结果
8
对
SSR
引物和
71
对
SRAP
引物呈现出多态性。本研究选
取与南瓜砧木嫁接亲和性差异明显甜瓜自交系
85-1
和
B717
杂交产生
F
2:3
群体，并通过调查遗传群体中
嫁接植株成活率、坐果率、果实甜度等指标进行亲和
性考察，使用成熟
BSA
法筛选嫁接亲和性相关基因连
锁标记时，方法简单、直观，研究结果具有可靠性。
嫁接亲和性分子机理的进一步分析为植株间
高效嫁接、利用嫁接优势更好的服务于农业生产提
供重要的意义和价值，该领域目前国内研究较少，
若能找到嫁接亲和性连锁距离更近的相关标记，将
会为甜瓜或者葫芦科植物嫁接研究带来重大突破。
本实验筛选的
2
对引物初步将两个甜瓜嫁接亲和性
差异明显的材料区分开来，至于这些标记能否用于
甜瓜大批量的嫁接鉴定，还需进一步验证。有关葫
芦科作物嫁接分子标记辅助选择，还需借鉴其他分
子技术进一步筛选，总之更多的嫁接相关分子机理
研究正蓄势待发。
3
材料和方法
3.1
实验材料
南瓜砧木“壮士”品种以及甜瓜接穗自交系
85-1