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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1438
-
1446
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1438
-
1446
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1442
1.3
OsDof
基因家族在黄化幼苗中的表达
顺式调控元件分析发现
30
个
OsDof
基因启动子
区富含光反应元件，为了进一步了解
OsDof
基因表
达对光信号的反应，我们利用定量
RT-PCR
比较了
30
个
OsDof
成员在水稻幼苗中黑暗与光照
(16 h
光
/8 h
暗
)
两种培养条件下的表达差异。结果显示
(
表
3)
，
25
个
OsDof
基因在黑暗条件下，幼苗叶片中的表达
水平高于其在光照条件下的表达，包括
5
个高丰度
表达、
8
个中丰度表达和
12
个低丰度表达
(
图
2)
。在
5
个高丰度表达基因中，
OsDof2
、
OsDof11
和
OsDof27
这
3
个基因在光照条件下表达丰度高，
OsDof24
和
OsDof5
则分别为中丰度和低丰度表达，但它们在暗
诱导下表达提高的倍数均较高。中丰度诱导表达基
因中，除
OsDof26
基因在光照下表达水平为中丰度，
其它基因均为低丰度表达。
OsDof9
、
OsDof25
、
Os-
Dof10
、
OsDof3
和
OsDof17
五个基因在光照与暗处理
图
2
荧光定量
PCR
分析
OsDof
基因在水稻黄化苗中的表达
注
: A:
暗处理下高表达
OsDof
基因
; B:
暗处理下中丰度表达
OsDof
基因
; C:
暗处理下低丰度表达
OsDof
基因
Figure 2 Epxression analysis of
OsDof
gene in rice etiolated seedling by qRT-PCR
Note: A: High expression of the
OsDof
genes under dark treatment; B: Middle abundance expression of the
OsDof
genes under dark
treatment; C: Low abundance expression of the
OsDof
genes under dark treatment
下，其表达水平没有发生明显变化。
1.4
不同胁迫下
OsDof
基因家族的表达特征
顺式作用元件分析发现部分
OsDof
基因上游
调控区含有激素和逆境胁迫反应相关的调控元件，
本实验对水稻幼苗分别进行了
200 μmol/L ABA
、
200 mmol/L NaCl
和
25% PEG
三种胁迫处理，定量
RT-PCR
分析各个
OsDof
基因在各种处理及未经处
理幼苗中的表达水平。结果如表
3
所示：
7
个
OsDof
基因受
ABA
诱导表达上调，
9
个基因表达下调，其中
OsDof2
、
OsDof27
、
OsDof24
和
OsDof11
诱导上下调
表达水平高，
OsDof12
和
OsDof3
诱导上下调倍数高
(
图
3A)
。在
NaCl
逆境下，
8
个基因的表达受到诱导，
10
个基因表达受到抑制，
OsDof27
、
OsDof11
、
OsD-
of2
、
OsDof24
和
OsDof5
诱导表达丰度及上调倍数较
高
(
图
3B)
。与
ABA
和
NaCl
处理不同的是，在
25%
的
PEG
处理中大部分基因
(21/30)
的表达受到诱导，仅
有
OsDof11
、
OsDof2
和
OsDof10
三个基因的表达受到
抑制，这三个基因表达丰度高且下调倍数高；在上
调表达基因中也有
4
个基因表达丰度高且上调倍数
高
(
图
3C)
。以上结果表明了大量的
OsDof
基因参与
了
ABA
、
NaCl
和
PEG
的表达调控，尤其是在
PEG
胁
迫下，大量基因受到诱导表达。
比较各个
OsDof
基因在
ABA
、
NaCl
、
PEG
及暗处
理
(
黄化苗
)
等
4
种胁迫条件下的表达水平
(
表
3)
，结果
显示：与未处理的水稻幼苗相比，
OsDof9
和
OsDof25