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何俊蓉等
, 2011, 13
个国兰品种遗传关系的
SRAP
分析
,
分子植物育种
Vol.9 No.86 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0086)
1623
续表
3
Continuing table 3
序号
Code
中文名
Chinese name
学名
Scientific name
种类
Species
花朵特征
Characteristics of the flowers
11
余蝴蝶
Yuhudie
Yuhudie
春兰
Cymbidium goeringii
绿色多瓣奇花；花瓣和萼片绿色，蕊柱和唇
瓣杂色
Green, much disc; wonderful; petal and sepal
green; gynostemium and labellum variegated
12
翠盖荷
Cuigai
Cuigai
春兰
Cymbidium goeringii
荷瓣；花瓣和萼片绿色，蕊柱和唇瓣杂色
Petal like water lily; petal and sepal green;
gynostemium and labellum variegated
13
张荷素
Zhanghesu
Zhanghesu
春兰
Cymbidium goeringii
荷瓣；花瓣和萼片绿色，蕊柱和唇瓣纯净无
杂色
Petal like water lily; petal and sepal
green; gynostemium and labellum pure
14
17
号
Shiqihao
Shiqihao
杂交
Hybrid
无花
No flowers
3.3 SRAP
反应
反应体系为
25 μL
，其中模版
100 μg
，
dNTPs
0.25 mmol/L
，引物
0.3 μmol/L
，
Mg
2+
2 mmol/L
，
Taq
酶
1 U
，不足部分用
ddH
2
O
补充。
PCR
扩增程序为：
94
℃
预变性
5 min
；
94
℃
变性
1 min
，
50
℃
复性
1 min
，
72
℃
延伸
2 min
，
44
个循环；
72
℃
延伸
10 min
，
4
℃
保存。扩增产物用
6% PAGE
胶分离，上样前用小
的注射器反复清洗点样孔。点样后，先用
200 V
电
压预电泳
20 min
，然后用
300 V
恒压电泳至二甲苯
青条带泳至胶约
1/2
处，电泳过程中确保胶板温度
不高于
50
℃
以免玻璃板破裂。电泳后将清洗后的胶
置于硝酸银染色液中染色，再把清洗后的胶放入预
冷的显影液中显影，然后拍照、保存。
3.4
数据分析
采用
Jaccardps
相似系数，使用
NTSYS
软件，
非加权组平均法
(UPGMA)
进行聚类分析。相似系数
计算公式为：
Sij =a/(a+b+c)
，其中
a
表示两份样品
共有带数，
b
表示
i
样品特有的条带数，
c
表示
j
样
品特有的条带数。
作者贡献
何俊蓉是项目的构思者及负责人，指导实验设计、数
据分析、论文的修改；蒋彧、刘菲、叶兰香是本研究的实验
设计、实验研究的执行人及完成数据分析、论文的撰写；孙
淑霞参与实验设计、实验结果分析，王海娥、卓碧萍参与实
验设计。全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究四川省科技支撑计划
(09ZC1745)
、
“
十二五
”
四川
省财政基因工程特色花卉项目、草本花卉新品种选育资助。
参考文献
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