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小豆组织培养和植株再生研究
田玉娥
1
,
刘红霞
1,2
,
赵波
1
,
曹劲宏
1
,
宋云星
1
,
张李
1
,
吴宝美
1
,
万平
1
1.
北京农学院植物科学技术学院
,
北京
, 102206
2.
甘肃农业大学农学院
,
兰州
, 730070
通讯作者
:
pingwan3@yahoo.com.cn;
作者
分子植物育种
, 2011
年
,
第
9
卷
,
第
35
篇
doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0035
收稿日期:
2010
年
11
月
18
日
接受日期:
2011
年
02
月
28
日
发表日期:
2011
年
03
月
30
日
这是一篇采用
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,
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引用格式:
田玉娥等
, 2011,
小豆组织培养和植株再生研究
,
分子植物育种
Vol.9 No.35 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0035)
摘
要
小豆再生体系建立是小豆基因功能分析和转基因研究的基础,本实验研究了小豆
GM278
、
GM13
、京农
5
号、京
农
6
号、京农
8
号和吉红
9
号的再生能力,分析了苗龄、外源激素、外植体种类对丛生芽诱导率的影响。不同小豆材料、苗
龄及外源激素浓度组配,不定芽的诱导率不同。小豆下胚轴是适宜再生的外植体,无菌苗龄以
5 d
之内为宜。京农
5
号品种
丛生芽再生率最高,达
82.5%
。适宜丛生芽诱导培养基是
MS+2 mg/L6-BA+7g/L
琼脂
+30 g/L
蔗糖,生根培养基为
1/2MS+0.1 mg/L IBA+7g/L
琼脂
+15 g/L
蔗糖。
关键词
小豆
;
组织培养
;
下胚轴
;
丛生芽
;
植株再生
Research on Tissue Culture and Plant regeneration of Azuki Bean (
Vigna
angularis
)
Tian Yue'e
1
, Liu Hongxia
2
, Zhao Bo
1
, Cao Jinghong
1
, Song Yunxing
1
, Zhang Li
1
, Wu Baomei
1
, Wan
Ping
1
1. Beijing University of Agricultural, College of Plant Science and Technology, Beijing, 102206, P.R. China
2. Gansu Agricultural University, College of Agriculture, Lanzhou, 730070, P.R. China
Corresponding author, pingwan3@yahoo.com.cn;
Authors
Abstract
Construction of azuki bean regeneration
system is essential for gene function analysis and transgene research.
Regeneration ability of GM278, GM13, Jingnong5, Jingnong6, Jingnong8 and Jihong9 were analyzed in this research. The effect of
seedling age, exogenous hormones, explants types on inducing cespitose buds frequency was explained. The
inducing rate of
adventitious shoots are different with different seedling age, hormone concentrations and ratio. Excised hypocotyl of sterile seedling
is more suitable explant for regeneration. Optimum seedling age of induced cespitose buds is in five days. Jingnong5 variety had
maximal
regenerated adventitious shoots frequence of 82.5% The culture medium
ingredient
s of MS, 2 mg/L 6
-
BA, 3% sucrose and
0.7% agar are useful for producing adventitious shoots. The culture medium of 1/2MS, 0.1 mg / L 6
-
BA, 15 g/L sucrose and 7 g/L
agar is propitious to rhizogenesis.
Keywords
Azuki bean (
Vigna angularis
); Hypocotyls; Cespitose buds; Plant regeneration
研究背景
小豆
(
Vigna angularisi
)
,又名红小豆、赤豆,起
源于中国,具有悠久栽培历史。世界上约有
24
个国
家种植小豆,但主要在亚洲种植,我国是世界最大
的小豆生产国和出口国,产品销往日本、韩国、新
加坡、马来西亚、菲律宾、欧美等
30
多个国家和地
区
(
林汝法和柴岩等
, 2002; http://www.mgcic.com/sh-
ow.php?articleid=1800)
。
植物外植体离体再生是植物遗传转化的基础,
豆科植物遗传转化频率低的主要原因之一是外植
体离体再生较困难。近年来,在大豆中以子叶节、
胚轴
(
袁鹰等
, 2001; Wang et al., 2003;
李明春和邢
来君等
, 2006;
李海燕等
, 2008)
、胚尖
(
张东旭等
,
2008)
为外植体,进行再生能力和转化体系研究
(
姬
月梅和邱丽娟等
, 2008)
。已见花生
(
张斌等
, 2006;
雷萍萍等
, 2009)
、蚕豆
(
刘洋
, 2010)
、豌豆
(
苏承刚等
,
2007)
、绿豆
(
张树录等
, 1986;
聂刘旺等
, 1999)
、苜
蓿
(
梁慧敏等
, 2003;
赵金梅
, 2010)
等豆科植物的组