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陈丽静等
, 2011,
百合
SRAP-PCR
反应体系的建立与优化
,
分子植物育种
Vol.9 No.24 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0024)
1180
表
6 SRAP
所用引物序列
Table 6 The primer sequences used in SRAP analysis
编号
Code
正向引物
Forword primers
编号
Code
反向引物
Reverse primers
ME1
5'GAGTCCAAACCGGATA3'
EM1
5'GACTGCGTACGAATTAAT3'
ME2
5'GAGTCCAAACCGGAGC3'
EM2
5'GACTGCGTACGAATTTGC3'
ME3
5'TGAGTCCAAACCGGAT3'
EM3
5'GACTGCGTACGAATTGAC3'
ME4
5'TGAGTCCAAACCGGACC3'
EM4
5'GACTGCGTACGAATTTGA3'
ME5
5'TGAGTCCAAACCGGAG3'
EM5
5'GACTGCGTACGAATTAAC3'
ME6
5'TGAGTCCAAACCGGTAA3'
EM6
5'GACTGCGTACGAATTGCA3'
ME7
5'TGAGTCCAAACCGGTCC3'
EM7
5'GACTGCGTACGAATTCAA3'
ME8
5'TGAGTCCAAACCGGTGC3'
EM8
5'GACTGCGTACGAATTCTG3'
ME9
5'TTCAGGGTGGCCGGATG3'
EM9
5'GACTGCGTACGAATTCGA3'
ME10
5'TGGGGACAACCCGGCTT3'
EM10
5'GACTGCGTACGAATACGA3'
EM11
5'GACTGCGTACGAATTCCA3'
4
结论
本试验利用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法研究
百合
SRAP
标记的最佳反应体系和反应程序。试
验结果表明，百合
SRAP
分析的最优反应体系为：
在
15 μL
反应体系中模板为
80 ng
，引物浓度为
0.11 μmol·L
-1
，
Mg
2+
浓度为
1.67 mmol·L
-1
，
dNTP
浓
度为
0.267 mmol·L
-1
，
1 U
的
Taq
酶。百合
SRAP
分
析的最佳反应程序为：
94
℃
1 min
，
34
℃
1 min
，
72
℃
1 min
，
5
个循环，
94
℃
1 min
，
50
℃
1 min
，
72
℃
1 min
，
35
个循环。
作者贡献
作者陈丽静负责本文初稿的执笔，曹珊负责本文初稿的
编辑及反复修改，王玉坤和刘烜晨做的聚丙烯酰胺凝胶电
泳，张丽引物的筛选，明军提供实验材料及文章的修改思路，
陶承光和李天来提供整体科研的思路，经费和文章的修改。
致谢
本研究由辽宁省教育厅项目
(L2010495)
、中国博士后科
学基金面上项目
(20100471471)
、国家高技术研究发展计划
(863
计划
)
项目
(2006AA100109)
资助。作者感谢天根公司刘
玉东在本实验过程中的技术支持和有益的建议。感谢同行评
审人的评审建议和修改建议。
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